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目的: 通过观察冷敏感受体TRPM8在远位触液神经元上存在表达,进一步探究远位触液神经元的功能和性质。
方法: 侧脑室注射霍乱毒素亚单位B与辣根过氧化物酶复合物(CB-HRP)追踪定位远位触液神经元,用四甲基联苯胺-钨酸钠(TMB-ST)的呈色反应及二甲基联苯胺-氯化钴(DAB-Co)稳定(TMB-ST-DAB-Co法)验证远位触液神经元的分布;并将CB-HRP/TRPM8免疫荧光双标与激光共聚焦显微镜技术相结合,观察TRPM8在远位触液神经元上的表达情况。Image-Pro Plus图像计数软件用于计算CB-HRP阳性、TRPM8阳性和CB-HRP/TRPM8双标阳性神经元细胞的数目。
结果: 远位触液神经元主要存在于中脑导水管腹侧中线脑实质内和桥脑上段第三、四脑室的灰质内。CB-HRP/TRPM8双标神经元占TRPM8阳性神经元百分比为42.93±2.29%;CB-HRP/TRPM8双标神经元与CB-HRP阳性神经元分布相同。
结论: 中脑远位触液神经核团内存在冷感觉受体TRPM8,提示远位触液神经元可能是通过TRPM8受体在脑-脑脊液之间的温度觉传递和痛觉调控中发挥重要作用。