【摘 要】
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目的:初步探讨纹蛋白(Striatin,STRN)通过调控PI3K/Akt信号通路对盐敏感高血压(salt-sensitive hypertension,SSH)大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖及凋亡的影响。方法:适应饲喂7周龄雄性SPF级Wistar大鼠(n=20)1周,测基础血压,随机分为对照组(CON组)(n=7)及高盐喂
【基金项目】
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国家自然科学基金(82060085); 遵义市第一人民医院 R&D 项目(院科字 2020 3 号)
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目的:初步探讨纹蛋白(Striatin,STRN)通过调控PI3K/Akt信号通路对盐敏感高血压(salt-sensitive hypertension,SSH)大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖及凋亡的影响。方法:适应饲喂7周龄雄性SPF级Wistar大鼠(n=20)1周,测基础血压,随机分为对照组(CON组)(n=7)及高盐喂养组(n=13),分别给予正常盐(含0.4%Na Cl)及高盐(含8.0%Na Cl)浓度颗粒饲料喂养,期间测各组大鼠鼠尾血压,测得收缩压≥140mm Hg判定为SSH(n=7)大鼠,分别取CON组及SSH组大鼠原代胸主动脉平滑肌细胞分离培养,然后做免疫荧光鉴定、q RT-PCR检测STRN的本底表达;分离培养的SSH组大鼠原代胸主动脉平滑肌细胞构建STRN过表达载体,采用PI3K/Akt抑制剂(LY294002)处理,分为对照组(Control)、过表达空载组(NC)、过表达组(STRN)、过表达空载+抑制剂组(NC+LY294002)及过表达+抑制剂组(STRN+LY294002),流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡,CCK-8法检测细胞增殖活力,Western blot检测STRN、PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt的蛋白表达情况。结果:1.与对照组(CON组)大鼠相比,盐敏感高血压大鼠组(SSH组)的STRN表达下降(P<0.05)。2.与PI3K/Akt抑制剂0μM浓度组相比,5μM、10μM、20μM、30μM及40μM浓度组细胞活力均显著下降(P均<0.05);随着抑制剂给药浓度增加,细胞活力随之受到抑制。3.与Control组相比,NC组和STRN组细胞的G0/G1期明显下降(P均<0.05),NC+LY294002组和STRN+LY294002组细胞的G0/G1期明显升高(P均<0.05);NC组和STRN组细胞的S期明显升高(P均<0.05),NC+LY294002组和STRN+LY294002组细胞的S期明显下降(P均<0.05);NC+LY294002组细胞的G2/M期明显下降(P<0.05),说明NC+LY294002组和STRN+LY294002组细胞被阻滞在G0/G1期。4.与Control组相比,NC组细胞的凋亡率明显下降(P<0.05),NC+LY294002组和STRN+LY294002组细胞的凋亡率显著上升(P均<0.05)。与Control组相比,NC组、STRN组、NC+LY294002组和STRN+LY294002组细胞的增殖率均显著上升(P均<0.05);与NC组相比,NC+LY294002组细胞的增殖率明显下降(P<0.05);与NC组相比,STRN组细胞的增殖率上升(P<0.05);与STRN组相比,NC+LY294002组细胞的增殖率显著下降(P<0.05)。说明STRN的过表达可以抑制细胞凋亡、促进细胞增殖。5.与Control组相比,STRN组p-Akt、p-PI3K和STRN显著上调表达(P均<0.05),NC+LY294002组和STRN+LY294002组p-Akt和p-PI3K显著上调表达(P均<0.05);与NC组相比,在STRN组中STRN显著上调表达(P<0.05),而且STRN组、NC+LY294002组和STRN+LY294002组的p-Akt和p-PI3K显著上调表达(P均<0.05);与STRN组相比,NC+LY294002组p-Akt和p-PI3K显著下调表达(P均<0.05)。结论:纹蛋白可能通过激活PI3K/Akt信号通路促进盐敏感高血压大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的增殖、抑制盐敏感高血压大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的凋亡。
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