穿山甲鳞甲乙醇提取物镇痛抗炎作用及其机制的实验研究

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目的:制备穿山甲鳞甲水提物和乙醇提取物,比较穿山甲鳞甲水提物和乙醇提取物的镇痛作用,研究穿山甲鳞甲乙醇提取物镇痛作用、抗炎作用、急性毒性。方法:(1)药物制备:分别采用水提法和醇提法制备穿山甲鳞甲水提物和穿山甲鳞甲乙醇提取物。(2)穿山甲鳞甲水提物和乙醇提取物镇痛作用的比较研究:穿山甲鳞甲水提物和乙醇提取物小鼠剂量为3.00g/kg、1.50g/kg、0.75g/kg灌胃给药,采用小鼠热板实验和醋酸扭体实验,观察穿山甲鳞甲水提物和乙醇提取物的镇痛作用。(3)穿山甲鳞甲乙醇提取物镇痛作用的实验研究:穿山甲鳞甲乙醇提取物按小鼠剂量为3.00g/kg、1.50g/kg、0.75g/kg和大鼠剂量为2.09g/kg、1.04g/kg、0.52g/kg灌胃给药,采用小鼠热板实验、小鼠光辐射热甩尾实验、小鼠醋酸扭体实验、角叉菜胶诱发大鼠炎症痛模型实验、测定大鼠角叉菜胶炎症痛模型中血清NA、血清PGE2及致炎足PGE2含量,研究穿山甲鳞甲乙醇提取物的镇痛作用及其作用机制。(4)穿山甲鳞甲乙醇提取物抗炎作用的实验研究:穿山甲鳞甲乙醇提取物按小鼠剂量为3.00g/kg、1.50g/kg、0.75g/kg和大鼠剂量为2.09g/kg、1.04g/kg、0.52g/kg灌胃给药,采用角叉菜胶致大鼠足跖肿胀实验、二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验、测定大鼠角叉菜胶致炎模型中血清SOD、 GSH-Px活力及MDA含量,研究穿山甲鳞甲乙醇提取物的抗炎作用及其作用机制。(5)穿山甲鳞甲乙醇提取物急性毒性实验:浓度0.30g/ml穿山甲鳞甲乙醇提取物小鼠剂量为0.4ml/10g灌胃给药,观察并记录小鼠中毒症状和死亡数,按生药量计算小鼠最大给药量。结果:(1)药物制备:制备穿山甲鳞甲水提物干粉和穿山甲鳞甲乙醇提取物干粉,穿山甲鳞甲水提物和乙醇提取物的提取率分别为7.54%和10.25%。(2)穿山甲鳞甲水提物和乙醇提取物镇痛作用的比较研究:穿山甲鳞甲水提物、乙醇提取物能提高小鼠热板实验的痛阈值(和空白对照组相比,P<0.05或P<0.01);能减少醋酸扭体实验中小鼠扭体次数(和空白对照组相比,P<0.05或P<0.01)。(3)穿山甲鳞甲乙醇提取物镇痛作用的实验研究:穿山甲鳞甲乙醇提取物能提高小鼠热板实验、小鼠光辐射热甩尾实验、角叉菜胶诱发大鼠炎症痛模型实验的痛阈值(和空白对照组相比,P<0.05或P<0.01);穿山甲鳞甲乙醇提取物能减少醋酸扭体实验中小鼠扭体次数(和空白对照组相比,P<0.05或P<0.01);穿山甲鳞甲乙醇提取物能降低大鼠角叉菜胶炎症痛模型中血清NA、血清PGE2以及致炎足PGE2的含量(和空白对照组相比,P<0.05或P<0.01);穿山甲鳞甲乙醇提取物镇痛作用强度与给药剂量成一定的量效关系。(4)穿山甲鳞甲乙醇提取物抗炎作用的实验研究:穿山甲鳞甲乙醇提取物对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀、二甲苯致小鼠耳廓肿胀均有抑制作用(和空白对照组相比,P<0.05或P<0.01);穿山甲鳞甲乙醇提取物能提高大鼠角叉菜胶致炎模型血清中SOD、GSH-Px活力,降低大鼠角叉菜胶致炎模型血清中MDA含量(和空白对照组相比,P<0.05或P<0.01);穿山甲鳞甲乙醇提取物抗炎作用强度与给药剂量成一定的量效关系。(5)穿山甲鳞甲乙醇提取物急性毒性实验:小鼠按日给药剂量24g/kg灌胃给药后,观察到空白对照组、穿山甲鳞甲乙醇提取物组分别有4只、6只小鼠出现呼吸稍促,活动减少,15min后自行好转,其后实验期间(7天内)未发现其它异常及死亡,测不出穿山甲鳞甲乙醇提取物的半数致死量(LD5o),实验结果显示,小鼠对穿山甲鳞甲乙醇提取物最大给药量为234.24g生药/kg,相当于人临床日给药剂量的1639.68倍。结论:(1)成功制备了穿山甲鳞甲水提物干粉和乙醇提取物干粉,乙醇提取物提取率大于水提物提取率。(2)穿山甲鳞甲水提物和乙醇提取物均具有镇痛作用,乙醇提取物的镇痛作用比水提物强,且乙醇提取物镇痛作用起效较快,持续时间较长。(3)穿山甲鳞甲乙醇提取物具有镇痛作用,其镇痛作用强度与给药剂量成一定的量效关系,其镇痛作用机制可能与降低NA、PGE2的含量有关。(4)穿山甲鳞甲乙醇提取物具有抗炎作用,其抗炎作用强度与给药剂量成一定的量效关系,其抗炎作用机制可能与升高SOD、GSH-Px活力、降低MDA、PGE2含量有关。(5)穿山甲鳞甲乙醇提取物急性毒性实验结果表明,穿山甲鳞甲乙醇提取物毒性低、安全性高。
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