早期胚胎卵裂球细胞具有发育全能性，每个胚胎卵裂球细胞在适宜的条件下都能单独发育为一个完整的个体。一个早期胚胎细胞可以分离多个卵裂球，以此作为核供体进行胚胎细胞核移植，可以大量扩繁优良品种的数量，增加濒危动物的数量，为科学研究提供大量遗传同质的动物，提高转基因和性别控制技术的效率，提供基因型相同的器官或组织供人类移植。 然而胚胎细胞核移植技术总的效率比较低，一个重要因素就是核移植技术的环节比较多，程序比较复杂。随着IVM-IVF-IVC胚胎工程技术和显微操作技术的不断发展，胚胎细胞核移植技术程序将逐渐得到简化和优化，为了探索适合实验室批量生产胚胎的细胞核移植操作条件，优化胚胎细胞核移植技术的程序进行了本实验。 本实验以猪为实验动物，对猪胚胎细胞核移植供体(早期胚胎细胞)的来源、卵裂球细胞分离方法、核移植重建胚的电激活最佳参数、核移植受体(去核卵母细胞)的激活时序以及核移植重建胚体外培养系统相关问题进行了研究，旨在探索一种适用于猪胚胎细胞核移植的科学方法，提高猪胚胎细胞核移植胚胎的体外发育率，优化胚胎细胞核移植程序。根据对实验数据的分析，研究结果如下： 试验1：早期胚胎细胞获得程序的优化。本实验以体外培养44～48h后成熟的卵母细胞进行IVF。通过比较不同类型精液(鲜精、附睾精液和冷冻—解冻精液)IVF的卵裂率、4～8-细胞胚胎率以及8-细胞以上胚胎率差异，筛选出适合本实验室获得早期胚胎细胞来源的精液。结果表明：IVF时，鲜精、附睾精液和冷冻—解冻精液组的卵裂率分别为40.83％(49／120)、39.47％(45／114)、34.68％(43／124)，差异显著(P＜0.05)；4～8-细胞胚胎率分别为16.67％(20／120)、15.79％(18／114)、15.32％(19／124)，差异不显著(P＞0.05)；8-细胞以上胚胎率分别为2.50％(3／120)、1.75％(2／114)、0.81％(1／124)，差异不显著(P＞0.05)；电激活孤雌对照组在卵裂率52.22％(47／90)、4～8-细胞胚胎率28.89％(26／90)和8-细胞以上胚胎率6.67％(6／90)上，与IVF组均差异极显著(P＜0.01)。实验结果说明，用冷冻—解冻精液IVF时，与用鲜精和附睾精液IVF的效果相当，可以不用超排体内胚胎，节约采集鲜精和附睾精液的时间和经费，优化胚胎细胞核移植的供核体来源。 试验2：胚胎卵裂球细胞分离方法的优化。本实验以酶消化法(0.25％链霉蛋白酶液、0.5％胰蛋白酶液和0.5％链霉蛋白酶液)和酸化法(酸性台氏液(pH 2.5))分离IVF早期胚胎卵裂球细胞，通过比较酶消化法和酸化法在胚胎卵裂球细胞分离时间和获得率上的差异，找出分离胚胎卵裂球细