癌变是指细胞在其生理活动中积累了遗传和表观遗传的改变，进而导致其蛋白组学的改变，从而使细胞进入一种不受控的生长状态。近年来，癌症的发病率一直呈上升趋势，并已成为人类生命和健康的严重威胁之一。在中国许多肿瘤中，原发性肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC)是第二大癌症死亡原因，也是全球范围内的第五大常见癌症。HCC发病与多种因素相关，包括肝炎病毒感染、黄曲霉素、酒精、肥胖、糖尿病等，并且主要受癌基因和抑癌基因的调控。与HCC发病相关的癌基因有myc基因和ras基因，相关的抑癌基因有P53、RB、RUNX3、PTEN等。HCC的发生是这些因素共同作用的结果。在HCC中，pten基因有较高的突变率，约为40%。pten基因于1997年被发现，被认为是一种重要的抑癌基因，其重要性仅次于RB、p53，它能使PIP3去磷酸化生成PIP2，负向调控PI3K/AKT信号通路，抑制肿瘤生长。在一些癌症中，人们无法检测到突变癌基因，如视网膜母细胞瘤中，人们只检测到RB基因的突变；在小鼠中，同时敲除p53和RB基因能引起小细胞肺癌。这就提示我们，在某些情况下，单是抑癌基因突变就可以引发肿瘤。鉴于pten在HCC中的高突变率，再加上lkb1和pten在PI3K/AKT/mTOR信号通路中的关键作用，因此我们提出在小鼠肝脏中同时敲除lkb1和pten基因，探索其对小鼠肝脏的影响。在本文中，利用Cre-loxP系统条件性基因敲除小鼠模型，通过尾静脉注射Cre病毒在肝脏中敲除lkb1/pten基因组合,进而研究lkb1/pten组合失活对肝脏影响。本文在小鼠一个月龄的时候将lkb1和pten组合敲除，敲除后6个月解剖时发现小鼠肝脏有类似肿瘤的节点，又进一步通过HE染色以及HCC的marker进行了验证，结果证明的确为HCC。之后又通过western和免疫组化初步研究了肝脏肿瘤组织相关蛋白的表达变化。有了lkb1/pten组合失活导致小鼠肝癌的表型后，紧接着希望在细胞水平上研究一下lkb1/pten组合失活对细胞的影响，进而研究相关的机制。本文选取了3T3（小鼠成纤维细胞）和AML12（小鼠正常肝脏细胞）两种细胞系，通过构建shlkb1和shPTEN的慢病毒质粒，病毒包装，慢病毒感染转染目的细胞，再通过puromycin和blasticidin抗生素筛选出稳定转染的细胞系。提取蛋白，免疫印迹检测相关蛋白的表达情况。本文western检测相关蛋白表达结果并不理想，并且在细胞中蛋白表达的变化情况跟小鼠肝脏肿瘤组织中蛋白表达的变化不一致，这可能是因为在细胞中基因敲低效率不够高的原因，也可能是因为存在不同的机制，因此还需进一步研究lkb1/pten组合失活导致小鼠HCC的机制。