花椒窄吉丁Agrilus zanthoxylum是我国北方花椒种植区的毁灭性蛀干害虫,于1988年首次被报道。但因其危害症状隐蔽,物理防治和单次施药的化学防治效果甚微,从而难于防控。嗅觉识别机制对于寄主的鉴定是至关重要的,但在花椒窄吉丁中尚未充分了解。气味结合蛋白在花椒窄吉丁定位寄主的生命过程中发挥着不可替代的作用。作为昆虫嗅觉识别过程的第一反应,气味结合蛋白参最先捕捉疏水性气味分子,将其传送至感器淋巴液。本研究以花椒窄吉丁的3个气味结合蛋白为研究对象,采用生物信息学和分子生物学方法,进行了原核表达纯化以及结构预测,并分析了气味结合蛋白AzanOBPs与寄主挥发物间的结合特性。主要结果如下:1.克隆到花椒窄吉丁AzanOBP4、AzanOBP5和AzanOBP7三个气味结合蛋白基因的全长序列,明确了5’端和3’端的非编码区。经生物信息学分析,发现三个基因的氨基酸序列都与苹果小吉丁的气味结合蛋白同源性较高,其中AzanOBP4和AzanOBP5属于Classic OBP家族,AzanOBP7属于Minus-C OBP家族。2.3个基因均能在花椒窄吉丁的不同组织（头、胸、腹、足和翅）中表达,其中AzanOBP7的相对表达量最高,AzanOBP5次之,AzanOBP4最少。雌性成虫中,基因Aznan OBP4在足（P=0.000）和翅（P=0.018）的表达量,基因AzanOBP5在腹（P=0.001）、足（P=0.002）和翅（P=0.001）的表达量,AzanOBP7在翅（P=0.018）的表达量均显著高于雄虫。雄性成虫中,仅基因AzanOBP7在腹（P=0.000）的表达量显著高于雌虫。3.成功构建了基因AzanOBP4、AzanOBP5和AzanOBP7的原核表达载体AzanOBPs/p ET-21a并获得其体外表达的融合蛋白His-AzanOBPs。成功纯化得到了2个融合蛋白His-AzanOBP5和His-AzanOBP7,发现均在在上清中表达。通过Western Blot验证了纯化后的融合蛋白即为目标蛋白。4.运用折叠识别方法,分别以Amel OBP5、Agam OBP20和Dmel GOBP1为主模板,成功构建了蛋白AzanOBP4、AzanOBP5和AzanOBP7的三维模型。5.以花椒窄吉丁3个蛋白AzanOBP4、AzanOBP5和AzanOBP7为受体,选择实验室前期检测的46种寄主挥发物为配体,进行半柔性对接。其中AzanOBP4与寄主挥发物的结合能集中在-8.7～-3.9 k J/mol;AzanOBP5与寄主挥发物的结合能分布在-7.0～-3.8 k J/mol;AzanOBP7与寄主挥发物的结合能分布在-7.1～-3.8 k J/mol,整体上AzanOBP4与寄主挥发物的结合能力较好。气味结合蛋白与寄主挥发物受体间,通过氢键、范德华力和疏水作用相结合,但范德华力和疏水作用更重要。筛选出β-石竹烯、葎草烯、反式-2-己烯醛与反式2-己烯-1醇,可作为花椒窄吉丁绿色防控药剂的配方成分。对花椒窄吉丁气味结合蛋白的研究结果,有助于探索花椒窄吉丁与寄主花椒挥发物之间的分子作用机制,为花椒窄吉丁的绿色防控提供理论指导。