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目的:化疗是现代癌症治疗的三大方法之一。化疗的过程中,化疗药物在杀死癌细胞的同时也产生了很多毒副作用,如胃肠动力紊乱,常导致患者出现腹胀、腹疼、肠鸣音消失或减弱、少排气、排便困难等症状。且严重胃肠道反应持续过久,易发生水电解质紊,这不但对患者的康复不利,也给周期性化疗带来一定的困难,致使化疗无法按照疗程进行,甚至放弃化疗,痛失治疗良机。而临床上,针灸在治疗胃肠道紊乱方面,有很好的疗效。本课题采用SD大鼠,一次性腹腔注射顺铂(DDP),造成小肠动力紊乱模型。通过检测肌间神经丛AchE、SP、nNOS、VIP的含量,以探讨针灸治疗DDP化疗大鼠小肠动力紊乱的机理。 方法:将44只SD大鼠,依据体重随机分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组。按5mg/kg的剂量,腹腔注射DDP溶液,其中,空白组注射同等剂量的生理盐水。24小时后造模成功,24小时候后,针刺组、艾灸组分别取“膈俞”、“脾俞”、“胃俞”、“肾俞”、“足三里”进行治疗,每天1次,连续治疗7天,在第8天处死大鼠,取空肠2-3cm长。用4%多聚甲醛溶液固定,做组织切片,进行组织化学染色。组织染色:按大鼠乙酰胆碱酯酶ELISA试剂盒、大鼠nNOS酶联免疫试剂盒、大鼠血管活性肠肽ELISA试剂盒和大鼠P物质ELISA试剂盒说明书上的程序操作。 使用德国Leica公司生产的QWin图像处理及分析系统对染色结果进行分析。于400倍光镜下每张铺片随机选取5个视野,图像经摄像机摄入后存入计算机内,进行彩色值分割参数估计,计算神经元阳性表达的平均面密度。面密度是指目标面积占统计场面积的百分比,反映神经元阳性表达在铺片标本中的含量。 数据分析采用SPSS13.0forWindows统计分析软件。计量资料数据以均数(x)±标准差(s)表示,各组间均数比较采用采用单因素方差分析,先进行方差齐性检验,方差齐则,进行方差分析,方差不齐,先校正方差,再进行方差分析,检验标准取α=0.05。 结果:顺铂腹腔注射后,与空白组相比,模型组、针刺组、艾灸组AchE的含量增加,模型组与空白组有显著性差异;与模型组相比,针刺组、艾灸组的AchE的含量降低,均有显著性差异;与针刺组比,艾灸组AchE含量升高,无显著性差异。与空白组相比,模型组、针刺组、艾灸组SP的含量增加,模型组、艾灸组都有显著性差异,针刺组无显著性差异;与模型组相比,针刺组、艾灸组SP的含量降低,均有显著性差异;与针刺组相比,艾灸组SP的含量升高,无显著性差异。与空白组相比,模型组、针刺组、艾灸组含量nNOS都降低,模型组、艾灸组无有显著性差异,针刺组有显著性差异;与模型组相比,针刺组nNOS的含量降低,而艾灸组nNOS的含量升高,但无显著性差异;与针刺组相比,艾灸组nNOS的含量增高,无显著性差异。与空白组相比,模型组、针刺组、艾灸组VIP的含量均降低,模型组有显著性差异,针刺组、艾灸组均无显著性差异;与模型组相比,针刺组、艾灸组VIP的含量升高,均有显著性差异;与针刺组相比,艾灸组VIP的含量升高,无显著性差异。 结论:本实验以腹腔注射顺铂的SD大鼠为实验对象,针灸治疗7天后,观察针灸对模型大鼠空肠肌间中AchE、SP、nNOS、VIP含量的影响,结果显示模型组大鼠空肠肌间神经丛中兴奋性递质AchE、P物质的含量增高,抑制性神经递质nNOS、VIP含量降低,因此,肌间神经丛中上述4种递质的紊乱,是顺铂致小肠动力较快的原因。针刺组大鼠通过7天的针灸治疗,其上升的神经递质AchE、P物质,含量下降,其下降的神经递质VIP含量上升,nNOS的含量降低,表明针刺通过对肌间神经丛肠神经递质含量的调节,可以间接的调整空肠的运动;艾灸的治疗使上升的神经递质AchE、P物质的含量下降,使下降神经递质nNOS、VIP的含量上升,通过对相互拮抗两组神经递质的调节,使DDP化疗所致的胃肠蠕动紊乱得到良性的调整,进而减轻化疗所致的胃肠道反应减低,减少对患者的损害。针灸对模型大鼠空肠肌间神经丛神经递质含量的这种调节作用,被认为是针灸对抗化疗后胃肠反应,减轻胃肠道动力紊乱的机制之一