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背景:心肌纤维化是以细胞外基质的广泛沉积为特点的一种病理表现,可导致心肌结构破坏,是多种心脏疾病的中间过程,如心肌梗死,肥厚型心肌病,病毒所致的扩张型心肌病和心脏衰竭等。因对其机制的认识有限,故治疗上困难重重。有研究证明吴茱萸碱(evodiamine)具有抑制动脉粥样硬化和保护心肌缺血再灌注损伤的作用,然而其对于心肌纤维化的作用尚不清楚。研究吴茱萸碱对心肌纤维化的作用,有利于对心肌纤维化机制的进一步阐明,为心肌纤维化的临床防治提供新的思路。目的:本研究将探索吴茱萸碱对异丙肾上腺素(ISO)诱导的心肌纤维化的效应及内皮-间质转化(EndMT)在其中的作用机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分为四组:对照组、ISO组、ISO/吴茱萸碱低剂量组和ISO/吴茱萸碱高剂量组。ISO皮下注射诱导心肌纤维化模型,吴茱萸碱处理组在给予ISO的同时以灌胃方式给药。14天后,对各组小鼠行心脏超声检查检测小鼠心脏功能,之后进行心脏取材并测量每只小鼠体重(BW)、心重(HW)及胫骨长度(TL),计算心重/体重比(HB/WB)及心重/胫骨长度比(HB/TL)。对心脏组织进行切片染色,提取蛋白和RNA,分别进行Western blot和PCR(Real Time-PCR)检测分子标志物以评价各组小鼠心肌纤维化和心肌肥厚的程度。再通过免疫荧光、免疫组织化学及Western blot检测血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)、CD34、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和波形蛋白(vimentin)评估内皮-间质转化水平。最后检测心肌组织TGF-β/Smad、Erk和Akt信号通路相关磷酸化蛋白及总蛋白表达量。结果:14天后ISO组和ISO/吴茱萸碱组对比,心重/体重比和心重/胫骨长比无显著变化,但ISO/吴茱萸碱组的心脏重量明显低于ISO组。通过病理染色和心肌肥厚及纤维化标志物基因表达检测发现吴茱萸碱可以阻止ISO诱导的心肌纤维化。ISO/吴茱萸碱组与ISO组对比CD31和CD34的表达量上升而α-SMA和vimentin的表达量下调,同时微血管密度(MVD)也明显上升,这表明吴茱萸碱可以抑制内皮-间质转化的发生。不仅如此,吴茱萸碱处理组TGF-β/Smad、Erk和Akt信号通路有关蛋白的磷酸化水平也低于ISO组。结论:一定剂量ISO皮下注射可成功诱导心肌纤维化模型。吴茱萸碱治疗可明显抑制ISO诱导的内皮-间质转化从而阻碍心肌纤维化,而这种保护作用可能是通过抑制TGF-β/Smad、Erk和Akt信号通路实现的。