黄颡鱼仔稚鱼消化系统发育研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:duanluchao
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黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)隶属于鲇形目、鲿科、黄颡鱼属,因其肉质鲜美而深受人们喜爱,近年来已在全国开展大规模的养殖,但在规模化苗种培育过程中仔稚鱼死亡率很高,严重制约了黄颡鱼养殖的发展。在课题组对黄颡鱼仔稚鱼消化系统发育进行了形态学、组织学及超微结构等方面的初步研究基础上,本研究进一步采用组织学及组织化学AB-PAS染色方法对黄颡鱼仔稚鱼消化道粘液细胞发育进行了研究,同时采用荧光定量PCR等分子生物学方法对黄颡鱼仔稚鱼消化系统发育过程中胃蛋白酶原、H+/K+-ATP酶及胰蛋白酶原基因表达进行了定量检测研究,以期掌握组织器官结构出现与功能完善过程,丰富黄颡鱼早期生活史的基础资料,同时也为规模化苗种培育制定合理的饵料投喂策略,提高仔稚鱼培育的成活率提供理论依据。主要研究结果如下:1、采用组织学HE染色及组织化学AB-PAS染色,对黄颡鱼仔稚鱼消化道进行组织学研究发现,1日龄仔鱼口咽腔封闭,胃呈封闭的椭圆状,细胞没有明显的分化,肠道为一空的直管,没有弯曲形成,肠道细胞分化不明显;AB-PAS染色没有检测到粘液细胞。3日龄仔鱼开口,口腔内可见味蕾,食道分化出杯状细胞,胃组织快速分化发育,与食道及肠道连通,组成上基本可以分成胃贲门部、胃体部和胃幽门部三个部分,粘膜上皮为单层柱状上皮,分化出胃腺、胃小凹及杯状细胞,此时胃粘膜褶皱不明显,肠道出现弯曲,肠粘膜出现褶皱,肠道粘膜上皮为单层柱状细胞,细胞核位于细胞中央,分化出杯状细胞;消化道AB-PAS染色较弱。5日龄AB-PAS染色显示口咽腔食道内存在少量的Ⅱ型粘液细胞,更加有利于食物的吞咽;胃粘膜上皮出现Ⅰ型粘液细胞,对胃内酸性环境具有一定的调节作用,并且有助于消化;肠道分布着少量Ⅲ型粘液细胞和Ⅳ型粘液细胞,表明消化功能进一步完善;15日龄食道分布着少量的Ⅲ型粘液细胞;25日龄黄颡鱼胃责门部分布着大量的胃腺、胃体部相对较少、胃幽门缺乏胃腺,肌层内斜行、中环行和外纵行分化明显。结果表明,黄颡鱼仔稚鱼消化道组织在3日龄迅速发育出基本结构,并随着日龄的增加结构逐渐完整,25日龄组织学结构与成鱼相近。2、采用荧光定量PCR的方法,对黄颡鱼仔稚鱼消化系统中胃蛋白酶原、H+/K+-ATP酶及胰蛋白酶原基因进行定量检测,结果发现胃蛋白酶原基因、胰蛋白酶原基因和H+/K+-ATP酶都在1日龄即开始表达,但表达量很小;胃蛋白酶原基因1日龄-8日龄表达量快速增加,8日龄-23日龄表达量没有明显增加,23日龄后表达量显著增加;胰蛋白酶原基因表达变化趋势与胃蛋白酶原基因相似近,1日龄-6日龄表达量快速增加,6日龄-23日龄表达量存在起伏并缓慢增加,23后日龄表达量显著增加;H+/K+-ATP酶基因表达基本呈直线增长趋势。结果表明黄颡鱼仔鱼出膜后,胃内环境是逐渐变酸。实验结果表明黄颡鱼仔鱼出膜后,蛋白质消化功能迅速发育,但在6-23日龄消化功能还处在完善的过程中。3、根据本研究结果,笔者认为6-23日龄黄颡鱼仔稚鱼尚处于发育敏感期,消化功能还在完善中,建议转饵时间在23日龄以后。
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