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实验一MgO NPs对白色念珠菌生长及生物膜形成的影响目的:研究不同浓度纳米氧化镁(Magnesium oxide nanoparticles,MgO NPs)对白色念珠菌生长及生物膜形成的影响。方法:通过扫描电子显微镜(SEM)、能谱分析(EDS)及透射电子显微镜(TEM)进行MgO NPs的表征。采用平板涂布菌落计数法测定MgO NPs抗白色念珠菌作用;体外建立白色念珠菌微孔板模型,通过结晶紫、MTT、倒置荧光显微镜检测或观察MgO NPs对白色念珠菌黏附、生物膜形态、生物膜生物量及代谢活性的影响。结果:1.通过TEM发现MgO NPs为类圆形结构,其尺寸为20-50nm,具有明显的聚集趋势。EDS光谱结果表明,除Mg和O外,MgO NPs中不存在其他杂质元素。2.MgO NPs对白色念珠菌具有有效的抗真菌活性,并呈现剂量依赖性。当MgO NPs达0.391mg/mL浮游细胞的生长被完全抑制,而浓度达1.563mg/ml可以起到杀真菌作用。3.结晶紫染色及MTT检测结果表明各实验组MgO NPs与对照组相比能显著抑制白色念珠菌生物膜的形成量及其代谢活性,其差异具有显著的统计学意义(p<0.001)。4.倒置荧光显微镜结果显示MgO NPs可以抑制白色念珠菌生物膜菌丝相的形成,实验组白色念珠菌形态主要以酵母相为主。5.粘附实验表明实验组不同浓度MgO NPs均可显著抑制白色念珠菌的初始粘附(p<0.001)。结论:MgO NPs能有效的抑制白色念珠菌生长、早期黏附及生物膜的形成。实验二MgO NPs-PMMA树脂基托对白色念珠菌抗菌作用研究目的:评估MgO NPs掺入聚甲基丙烯酸甲酯树脂(Polymethyl methacrylate,PMMA)中对材料表面亲水性,表面粗糙度及白色念珠菌生长的影响。方法:制备含有不同质量分数(2%,4%,6%,8%)的MgO NPs-PMMA树脂基托样本,通过SEM及EDS对MgO NPs-PMMA树脂进行表面表征。分别采用接触角测量仪及原子力显微镜(AFM)测量树脂基托表面亲水性及粗糙度。然后通过薄膜密着菌落计数的方法,评估MgO NPs-PMMA树脂基托对白色念珠菌生长的抑菌作用。结果:1.通过SEM及EDS对MgO NPs-PMMA树脂进行表面表征。SEM示MgO NPs成功嵌入到PMMA树脂中。通过EDS可以发现对照组中没有Mg元素的存在,随着MgO NPs添加剂量的增加,EDS分析中Mg及O元素的含量随之增加。2.通过测量样品的水接触角来评估样品的润湿性(P<0.001)。对照组的接触角平均值最高(73.56±4.58),8%MgO NPs-PMMA树脂组最低(64.87±1.78)。随着MgO NPs浓度增加,接触角呈下降趋势(P<0.001)。3.AFM用于检测树脂基托表面粗糙度,2%MgO NPs-PMMA树脂表面的平均粗糙度值(12.21±3.49)与对照组(8.85±1.85)之间没有明显差异(p>0.05)。当MgO NPs的添加剂量超过2%时,MgO NPs-PMMA树脂表面粗糙度值与对照组之间存在差异(p<0.05),8%MgO NPs-PMMA树脂组粗糙度值最高(26.07±3.64)。4.与空白对照组相比,抗菌剂浓度为2%时,MgO NPs-PMMA树脂基托对白色念珠菌的平均抗菌率为58.76%;随MgO NPs抗菌剂添加剂量的增加抗菌率亦随之提高,当MgO NPs添加量达到8%时,MgO NPs-PMMA树脂基托对白色念珠菌的平均抗菌率可以达到93%。结论:MgO NPs-PMMA树脂基托呈现出抗真菌活性,可以抑制其表面白色念珠菌的生长。