HPLC-FLD检测鸡血浆、蛋和排泄物中阿莫西林和氨苄西林残留及其消除规律的研究

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本研究以京海黄鸡为试验素材,分别建立了鸡血浆、鸡蛋和鸡排泄物中阿莫西林(AMO)和氨苄西林(AMP)检测的高效液相色谱荧光检测法(HPLC-FLD),并通过试验鸡分别以25.0、50.0mg·kg-1·b.w.·d-1剂量内服AMO和以60.0、120mg·kg-1·b.w.·d-1剂量内服AMP,每天给药1次,连续5d,分别研究了鸡血浆、鸡蛋和鸡排泄物中AMO和AMP的残留消除规律,为动物源性食品中AMO和AMP残留检测标准的制定和养鸡业中科学合理使用AMO和AMP、开发无公害禽产品、降低抗生素对环境的污染提供科学依据。主要研究结果如下:1、研究了阿莫西林和氨苄西林在鸡血浆中残留的HPLC-FLD法及其残留消除规律。鸡血浆经乙腈提取,饱和二氯甲烷萃取,经水杨醛在酸性条件下沸水浴衍生后,高效液相色谱荧光检测器检测。AMO、AMP均在5.0ng·mL-1~5000.0ng·mL-1浓度范围内,本方法线性关系良好,相关系数分别为0.9999、0.9996。当AMO、AMP添加水平均为5.0~125.0μg·mL-1时,鸡血浆样品平均回收率均高于74.72%,相对标准偏差(RSD)均低于10.66%。测定鸡血浆样品中AMO的检测限(LOD)为2.0ng·mL-1(S/N=3)、定量限(LOQ)为5.0ng·mL-1(S/N=10), AMP的检测限均为l.0ng·mL-1(S/N=3)、定量限均为2.5ng·mL-1(S/N=10)。产蛋鸡分别以25.0,50.0mg·kg-1·b.w.·d-1刘量内服AMO和以60.0、120.0mg·kg-1·b.w.·d-1剂量内服AMP,每天给药1次,连续5d内服给药后,在给药期间,鸡血浆中AMO和AMP残留量呈上升趋势,给药第5d时,血浆中药物浓度达到峰值。在停药第1d时,血浆中药物浓度急剧下降,AMO在停药第2d时,血浆中药物浓度低于检测限;AMP在停药第3d时,低于检测限。2、研究了阿莫西林和氨苄西林在鸡蛋中残留的HPLC-FLD法及其残留消除规律。鸡蛋经乙腈提取,饱和二氯甲烷萃取,经水杨醛在酸性条件下沸水浴衍生后,高效液相色谱荧光检测器检测。AMO、AMP均在5.0ng·mL-1~800.0ng·mL-1浓度范围内,本方法线性关系良好,相关系数分别为0.9998、0.9999。当AMO、AMP添加水平均为5.0~125.0ng·g-1时,鸡蛋样品平均回收率均高于78.30%,RSD均低于7.25%。测定鸡蛋样品中AMO的检测限均为1.2ng·g-1(S/N=3)、定量限均为3.9ng·g-1(S/N=10), AMP的检测限均为0.5ng·g-1(S/N=3)、定量限均为1.2ng·g-1(S/N=10)o产蛋鸡分别以25.0、50.0mg·kg-1·b.w.·d-1剂量内服AMO和以60.0、120.0mg·kg-1·b.w.·d-1剂量内服AMP,每天给药1次,连续5d内服给药后,蛋清、蛋黄和全蛋中AMO和AMP残留量呈上升趋势。休药第1d时,蛋清中AMO和AMP残留量均达到峰值,而蛋黄在休药第2d时达到峰值。休药前期蛋清、蛋黄及全蛋中AMO和AMP残留消除较快,后期消除缓慢。休药11d时,全蛋中AMO和AMP残留量均低于检测限;参考日本《肯定列表制度》关于阿莫西林在鸡蛋中的最高残留限量(MRLs)标准(l0μg·kg-1),建议产蛋鸡以25.0mg·kg-1·b.w.d和50mg·kg-1·b.w.d的剂量连续5d,每天1次内服AMO时,其休药期(WDT)均为5d;建议产蛋鸡以60.0mg·kg-1·b.w.d和120.0mg·kg-1·b.w.d的剂量连续5d,每天1次内服AMP时,其WDT为6d和7d。3、研究了阿莫西林和氨苄西林在鸡排泄物中残留的HPLC-FLD法及其残留消除规律。鸡排泄物经乙腈提取,饱和二氯甲烷萃取,经水杨醛在酸性条件下沸水浴衍生后,高效液相色谱荧光检测器检测。AMO、AMP均在0.1~250.0μgmL-1浓度范围内,本方法线性关系良好,相关系数分别为0.9998、0.9998。当AMO、AMP添加水平均为5.0~125.01μg·g-1时,鸡排泄物样品平均回收率均高于74.72%,RSD均低于10.60%。测定鸡排泄物样品中AMO的检测限为3.0ng·g-1(S/N=3)、定量限为6.0ng·g-1(S/N=10), AMP的检测限为1.2ng·g-1(S/N=3)、定量限为3.5ng·g-1(S/N=10)。产蛋鸡分别以25.0、50.0mg·kg-1·b.w.·d-1剂量内服AMO和以60.0、120.0mg·kg-1·b.w.·d-1剂量内服AMP,每天给药1次,连续5d内服给药后,在给药期间,鸡排泄物中AMO和AMP残留量呈上升趋势。投药剂量为25.0mg·kg-·b.w.·d-1试验组,给药第5d时,AMO残留量均达到峰值,休药第5d时,其残留量低于检测限。投药剂量为50.0mg·kg-1·-b.w.·d-1试验组,给药第5d时,AMO残留量达到峰值,休药第5d时,其残留量低于检测限。AMP两个试验组在给药期间均呈上升趋势,给药第7d时,AMP残留量均达峰值;停药后均在第7d时,低于检测限。
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