目的：　　1.研究正常人群血浆血管内皮细胞生长因子受体1（vascular endothelial growth factor receptor1，VEGFR1）和上皮生长因子受体2（epidermal growth factor receptor2，EGFR2 or HER2）天然自身抗体含量。　　2.研究富含VEGFR1和HER2天然自身抗体对鼻咽癌细胞增殖的影响。　　3.研究富含VEGFR1和HER2天然自身抗体对鼻咽癌细胞凋亡和周期的影响。　　4.探讨富含VEGFR1和HER2天然自身抗体对鼻咽癌细胞影响的机制。　　方法：　　1.抗原设计：从NCBI数据库检索VEGFR1和HER2的完整氨基酸序列，使用MHC-II类抗原表位工具NetMHCIIpan分析VEGFR1和HER2序列，设计适宜的多肽抗原序列，命名为 NPAV1和 NPAE2，上海生工生物工程有限公司合成。　　2.血浆的筛选：利用ELLSA法从150份健康献血者血浆中分别筛选含有NPAV1和 NPAE2多肽抗原相应天然自身抗体的健康献血者血浆，分别命名为V1和 E2。富含天然自身抗体的血浆分为 A、B两组，分别来源于富含天然自身抗体排名最前面的两个健康献血者血浆；低含天然自身抗体的血浆组为天然自身抗体含量排名最后面的两个健康献血者血浆混合而成，用N组表示。　　3. V1和E2血浆对鼻咽癌细胞增殖的影响：利用筛选出的富含和低含天然自身抗体的血浆对鼻咽癌CNE1、CNE2、HNE1、HONE1细胞进行培养，通过预实验发现血浆浓度达到15%，细胞培养至48h时，富含天然自身抗体的血浆对鼻咽癌细胞的抑制效果最明显，所以正式实验均采用这样的培养条件进行细胞增殖的测定，并计算细胞活度，然后观察和分析血浆对鼻咽癌细胞增殖的影响。　　4. V1和E2血浆对鼻咽癌细胞凋亡的影响：根据细胞增殖实验，利用V1 和E2作用于鼻咽癌HONE1和CNE2细胞，分别培养至24 h和48 h，用流式细胞术检测鼻咽癌细胞凋亡。　　5. V1血浆对鼻咽癌细胞周期的影响：利用V1血浆作用于鼻咽癌HONE1细胞，分别培养24 h和48 h，用流式细胞术检测鼻咽癌细胞周期。　　6.鼻咽癌细胞VEGFR1和HER2 mRNA的表达：分别提取4种鼻咽癌细胞总RNA，利用实时定量荧光PCR扩增和检测 VEGFR1和 HER2的mRNA表达。　　结果：　　1.用ELLSA法分别筛选富含和低含VEGFR1和HER2天然自身抗体的血浆：从150份健康献血者血浆中筛选NPAV1和NPAE2多肽抗原相应的的血浆，命名为V1和E2血浆，每种血浆分为A和B两组，来自两个正常人其中V1阳性样品比值（positive sample ratio, PSR）为1.64和1.57；E2 PSR为1.64和1.55。两个低含VEGFR1和HER2天然自身抗体的血浆混合作为低含组使用，两个低含血浆PSR为0.21和0.19。　　2. V1和E2血浆对鼻咽癌细胞增殖的影响：用V1血浆分别培养鼻咽癌细胞CNE1、HONE1和HNE148 h，实验A和B组细胞增殖PSR明显低于实验N组，差异具有统计学意义（P<0.01）；在鼻咽癌细胞CNE2中，实验A和B组PSR与实验N组比较差异不明显，未见统计学意义（P>0.05）。用E2血浆培养鼻咽癌HONE1细胞48 h，实验A和B组细胞增殖的PSR明显低于实验N组，差异具有统计学意义（P<0.01）；用E2血浆培养鼻咽癌细胞CNE1、CNE2和HNE1，实验A和B组鼻咽癌细胞增殖的PSR与实验N组比较差异不显著，无统计学意义（P>0.05）。　　3. V1和E2血浆对鼻咽癌细胞凋亡的影响：在细胞增殖实验基础上，选择V1和E2血浆分别培养鼻咽癌细胞HONE1和CNE2至24h或48 h，V1和E2血浆作用于鼻咽癌细胞 HONE1A组细胞凋亡明显高于实验 N组，差异具有统计学意义（P<0.01），而V1血浆作用于鼻咽癌细胞CNE2A组细胞凋亡与实验N组比较差异不明显，未见统计学意义（P>0.05）。　　4. V1血浆对鼻咽癌细胞周期的影响：在细胞增殖实验基础上，选择V1血浆培养鼻咽癌细胞HONE124h或48 h，V1血浆作用于鼻咽癌细胞HONE1的A 组G2/M周期阻滞明显高于N组，差异具有统计学意义（P<0.01），V1血浆作用于鼻咽癌细胞HONE1的A组G1和S期阻滞与N组比较无明显变化，未见显著性差异（P>0.05）。　　5.四种鼻咽癌细胞VEGFR1和HER2的mRNA表达：实时定量荧光PCR扩增分析四种鼻咽癌VEGFR1和HER2的mRNA表达，结果显示鼻咽癌HONE1和HNE1细胞VEGFR1的 mRNA表达明显高于CNE2，差异具有统计学意义（P<0.01），而鼻咽癌HONE1细胞HER2的 mRNA表达明显高于CNE2，差异具有统计学意义（P<0.01）。　　结论：　　1.富含VEGFR1和HER2天然自身抗体的血浆对鼻咽癌细胞生长具有抑制作用。　　2.富含VEGFR1和HER2天然自身抗体的血浆抑制鼻咽癌细胞增殖的作用可能通过诱导鼻咽癌细胞凋亡和G2/M期阻滞而实现。　　3.鼻咽癌细胞VEGFR1和HER2的mRNA基因表达量越高，富含VEGFR1和HER2天然自身抗体的血浆抑制鼻咽癌细胞增殖的程度越明显。