第一部分¹⁸F-PET/CT对淋巴瘤的诊断及最大标准摄取值(SUV_max)的应用价值【目的】探讨¹⁸F-PET/CT对淋巴瘤诊断的准确率及最大标准摄取值(SUV_max)在实际临床应用中的指导意义。【材料与方法】回顾性分析2012年1月至2014年2月间100例原发淋巴瘤患者的PET-CT显像结果,所有病例均以病理确诊为金标准,并且均未进行手术或者化疗等任何干预措施。分析PET/CT诊断的准确率并按病理类型分组,将各类型原发淋巴瘤患者SUV_max进行比较,并且在弥漫大B淋巴瘤患者中比较SUV_max在不同BCL-2分子表达、性别、年龄、是否骨转移之间的差别及与增值指数Ki-67表达的相关性。所有数据均进行t检验或方差分析,数据为非正太分布或方差不齐时采用秩和检验,用Pearson相关性分析检验SUV_max与Ki-67之间的相关关系。【结果】100例经病理证实的淋巴瘤患者中,霍奇金病5例,非霍奇金淋巴瘤95例,后者包括60例弥漫大B细淋巴瘤,8例滤泡淋巴瘤,7例NK/T细胞淋巴瘤,8例外周T细胞淋巴瘤,黏膜相关及套细胞淋巴瘤各4例,4例确诊淋巴瘤但仍未明确具体病理类型。PET-CT误诊10例,误诊率为10%,其中6例发生在胃及结肠并且其中2例PET-CT表现无任何异常。按病理类型分组,霍奇金病最大标准摄取值(SUV_max)为16.8±9.3,非霍奇金淋巴瘤为17.0±9.1,其中弥漫大B为18.9±8.9,滤泡淋巴瘤为7.8±5.4 NK/T为18.7±6.6,外周T细胞淋巴瘤为16.4±8.9,经统计分析,霍奇金病与非霍奇金淋巴瘤SUV_max不存在统计学差异（x2=0.0136,p=0.9071）。在非霍奇金淋巴瘤中,弥漫大B淋巴瘤与滤泡淋巴瘤、滤泡淋巴瘤与NK/T淋巴瘤、滤泡淋巴瘤与外周T细胞淋巴瘤之间SUV_max均存在统计学差异（p值分别为0.0004,0.0078,0.0117）。在弥漫大B患者中,SUV_max在BCL-2不同表达（阳性:18.3±7.8,阴性:24.5±10.9,t=1.6 p>0.05）、不同年龄阶段(按照联合国年龄划分规定分为青年组（（<44岁,14.6±3.9）中年组（45⁵9岁,18.6±8.1）老年组（>60岁,20.9±10.5）F=1.53,p>0.05）、不同性别（男,18.9±9.1、女,19.2±9.3,t=-0.12,p>0.05）是否发生骨转移（转移:20.4±1.2,未转移:19.6±8.7,x2=0.1,p>0.05）中均无统计学差异。SUV_max与增值指数ki-67的表达率存在相关性（相关系数r=0.33,p=0.018）。【结论】PET-CT在原发性淋巴瘤的诊断中具有重要意义,最大标准摄取值(SUV_max)在不同的淋巴瘤亚型鉴别诊断中具有一定的指导意义,并且SUV_max与Ki-67表达相关,一定程度上反应淋巴瘤增殖能力。第二部分BCMA及RasGRP4分子在淋巴瘤中的表达及对肿瘤细胞凋亡的影响【目的】通过对与淋巴瘤发生、发展密切相关的BCMA、RasGRP4分子的研究,期望开发相关的影像诊断分子探针,应用于临床诊断及治疗。【材料与方法】通过基因芯片发现目标分子BCMA及RasGRP4。收集弥漫大B淋巴瘤、滤泡淋巴瘤、Burkitt细胞淋巴瘤、人黏膜相关淋巴组织淋巴瘤、小淋巴细胞淋巴瘤及浆细胞淋巴瘤等各类型、各不同恶性级别的经病理确诊的淋巴瘤病例石蜡块,免疫组化验证BCMA的表达情况,通过电转相应的cDNA在Raji淋巴瘤细胞系里验证该分子对淋巴瘤的细胞凋亡的影响。同样通过免疫组化验证RasGRP4分子在淋巴瘤中的表达,同时,收集新鲜淋巴结通过研磨后流式分选正常B细胞与弥漫大B淋巴瘤细胞系SUDHL-4在western水平检测RasGRP4蛋白表达差异,电转相应shRNA达到在弥漫大B淋巴瘤细胞系里验证RasGRP4对凋亡的影响。【结果】对29例淋巴瘤病例与5例正常对照淋巴结组织进行免疫组化染色后发现,在弥漫大B淋巴瘤、滤泡淋巴瘤、Burkitt细胞淋巴瘤、人黏膜相关淋巴组织淋巴瘤、小淋巴细胞淋巴瘤及浆细胞淋巴瘤等各类型淋巴瘤中,BCMA的表达均低于正常对照组,并且在收集到的不同级别的滤泡淋巴瘤中,BCMA分子的表达表现出与恶性级别的相关性,恶性级别越高,BCMA表达越低。Raji细胞系电转BCMA的相应cDNA质粒及对照质粒后,在48及72小时时间点检测均发现转染组的早期及晚期凋亡均远高于对照组,48小时,转染了目的cDNA的Raji细胞早期凋亡细胞占总细胞的比例为4.69%,对照组为2.32%,晚期凋亡及坏死细胞比例在转染组为12.81%,对照组为7.65%;在72小时,早期和晚期凋亡比例在两组中分别为11.79%,6.38%及3.43%,2.14%。免疫组化和western均验证了RasGRP4分子在弥漫大B淋巴瘤中的表达远高于正常淋巴结及B细胞,在弥漫大B淋巴瘤中电转相应的shRNA沉默RasGRP4的表达后,电转组的凋亡率明显高于对照组,在48小时,RasGRP4基因沉默组SUDHL-4细胞早期及晚期凋亡细胞占总细胞的比例分别为4.21%及0.97%,对照组为1.39%及0.3%,转染6天后检测,shRNA组的SUDHL-4细胞晚期凋亡细胞占总细胞的比例为6.35%,对照组为3.89%。【结论】BCMA在多种淋巴瘤亚型中表达均低于正常淋巴结,并且低表达程度很可能能够反应淋巴瘤的恶性度,RasGRP4在弥漫大B淋巴瘤中的表达明显高于正常淋巴结组织,并且BCMA及RasGRP4分子均在淋巴瘤细胞的恶性增殖及抗凋亡机制中起重要作用。第三部分¹⁸F-FDG PET-CT的SUV_max与淋巴瘤BCMA及RasGRP4分子表达的相关性研究【目的】探索淋巴瘤BCMA及RasGRP4分子表达与PET-CT常用指标SUV_max之间的相关性,为开发淋巴瘤相关影像诊断分子探针打下基础。【材料与方法】收集经病理确诊的弥漫大B淋巴瘤14例,在相同的条件下分别免疫组化染色BCMA分子及RasGRP4分子,表达量通过mage Pro Plus 6.0软件统计累积光密度（Integrated option density,IOD）进行半定量分析。所有纳入病例均在相同的扫描条件及参数设置下完成扫描的PET-CT图像,由2名经验丰富的医师分别单独对PET/CT图像进行分析,各自统计SUV_max值及临床基本信息,通过统计分析,分别探究BCMA及RasGRP4分子表达量与该淋巴瘤病人PET-CT的SUV_max值之间的相关性。【结果】共纳入14例弥漫大B淋巴瘤病人,其中9例女性,5例男性,平均年龄为63岁,其中,9例病例的PET-CT扫描成像的标准摄取值（SUV）最高处位于淋巴结病灶,其余5例发生在脑、额窦、扁桃体、胸椎及纵膈。纳入病例的SUV_max值最大为51,位于扁桃体弥漫大B淋巴瘤病灶,最小为12.3,位于淋巴结淋巴瘤病灶,平均SUV_max值为22.4。BCMA免疫组化平均累计IOD未发现与SUV_max间存在明确的负相关关系（r=0.0867,p=0.8245）,而RasGRP4免疫组化平均累计IOD与SUV_max间存在相关关系,相关系数r=0.73,P=0.025,有统计学意义。【结论】RasGRP4分子表达与SUV_max值有相关性,在一定程度上反应了弥漫大B淋巴瘤的代谢活跃程度、增殖程度,将有可能开发为弥漫大B淋巴瘤特异性影像诊断分子探针。