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本论文以东南沿海重要海产经济鱼类——卵形鲳鲹为研究对象,通过细菌感染和动物组织细菌平板涂布计数,检测卵形鲳鲹感染美人鱼发光杆菌后,其肾组织内细菌含量随时间的变化;并通过基因克隆和RACE-PCR技术获得GATA-3基因的全长序列,分析其结构特征;通过Real time-PCR技术检测GATA-3、T-bet、转铁蛋白、C-型溶菌酶在卵形鲳鲹不同组织中的相对表达差异,以及在感染美人鱼发光杆菌后GATA-3、GATA-3相关因子IL-4、T-bet、T-bet相关因子(IL-12、IL-1β、IFN-γ、TNF-α)以及抗菌相关因子(转铁蛋白、C-型溶菌酶)表达量随时间的变化,研究Th细胞分化为Th1/Th2细胞标志性转录因子GATA-3和T-bet及其它相关因子对美人鱼发光杆菌感染的响应。主要研究结果如下:1、卵形鲳鲹GATA-3基因的克隆与序列分析卵形鲳鲹GATA-3 cDNA基因全长为2347bp,其中,ORF为1197bp,编码398个氨基酸,含有两个高度保守的锌指结构,推测蛋白质质量为43.1258KD,理论等电点为9.87。同源性分析显示,该基因编码的蛋白与红笛鲷的同源性高达99%,与其它鱼类的同源性为88%-96%。与哺乳类的同源性在80%左右,与青蛙的同源性为75%。2、卵形鲳鲹GATA-3、T-bet在不同组织中的表达在所检测的11个组织中,卵形鲳鲹GATA-3基因在鳃中的表达量最高,其次是肝脏、肾脏、皮肤和脑等,再次脾脏和头肾等,在胃中的表达量最低。T-bet基因在肾脏中表达量最高,在脑中表达量最低,其中在肾脏、脾脏、鳃、头肾、肝脏的表达量显著高于其他组织(P<0.05)。3、细菌感染后卵形鲳鲹肾组织内细菌数量变化在感染后3-96h内,肾组织内细菌数量逐渐降低。其中,在3-24h内细菌数量下降明显,在24-48h内细菌数量相对稳定,48h之后又下降明显,但没有3-24h下降显著。与此同时,在12-24h卵形鲳鲹死亡率最多,在24-48h死亡率较低,48h后无死亡出现。4、卵形鲳鲹Th细胞分化相关因子对美人鱼发光杆菌感染的响应在感染美人鱼发光杆菌后,与对照组相比,GATA-3的表达量在鳃和肾脏中24h表达量最高,在脾脏中72h表达量达最高,在肠和肝脏中48h最高,在头肾中96h表达量最高,其中在脾脏、肝脏和头肾中显著高于对照组。IL-4在肾脏中12h表达量显著低于对照组,在头肾中48h和96h表达量显著低于对照组。T-bet在鳃和肾脏中24h表达量最高,在脾脏中72h表达量达最高,在肠和肝脏中48h最高,在头肾中96h表达量最高,其中,在肝脏和头肾中显著高于对照组。IL-12在肾脏中12h表达量达最高,且与对照组差异显著,在头肾中48h表达量达最高。IFN-γ在肾脏和头肾中表达量在3h表达量达最高,且都显著高于对照组。TNF-α在肾脏中24h达最大相对表达量,且显著高于对照组,在头肾中48h相对表达量达最高。5、卵形鲳鲹转铁蛋白和C-型溶菌酶的表达分析基因组织表达分布试验显示:转铁蛋白在肝脏中表达量极高,是其他组织的103-104倍;C-型溶菌酶在头肾中的表达量最高,其次是肾脏,在胃中的表达量最低。在感染试验中,转铁蛋白在肾脏中6h试验组相对于对照组表达量最高,并且与对照组差异显著(P<0.05),在头肾中3h表达量达最高;C-型溶菌酶在肾脏中的表达量一直低于对照组,且在72h显著,96h极显著的低于对照组,在头肾中的表达量也没有明显的增大。