目的研究miRNA-101(miR-101)通过对EZH2基因的靶向调控作用,介导膀胱癌的发生发展。方法1.运用Real-time PCR检测miR-101在膀胱癌及相应的癌旁组织中的表达量;2.采用组织芯片,通过免疫组织化学法检测EZH2基因在膀胱癌组织及相应的癌旁组织中的表达情况;3.运用RT-PCR及Western blot分别检测EZH2基因在膀胱癌及相应的癌旁组织中mRNA及蛋白表达情况;4.运用mi RNA预测软件:miRanda、PicTar和Targetscan,预测与EZH2 mRNA3’-UTR有互补结合位点的miRNA;5.运用双荧光素酶基因报告系统检测miR-101与EZH2 mRNA 3’-UTR是否有互补结合靶点;结果通过Real-time PCR检测显示mi R-101在膀胱癌组织中转录水平均低于相应的癌旁组织(P<0.05),提示其可能在膀胱癌的发生、发展中起到了抑癌作用;通过免疫组织化学法、RT-PCR、Western blot法检测显示EZH2在膀胱癌组织中表达量均高于相应的癌旁组织(P<0.05),提示其可能在膀胱癌的进展中发挥了促癌作用;通过miRanda、PicTar和Targetscan三个软件检测显示miR-101与EZH2 3’-UTR有互补结合位点;通过双荧光素酶基因报告系统检测进一步证明miR-101与EZH2 3’-UTR有互补结合位点,并抑制其表达;结论miRNA-101通过负向调控EZH2基因的表达,发挥抑制膀胱癌的作用效应。