黄曲霉毒素B₁（AFB₁）是一种由真菌黄曲霉和寄生曲霉通过聚酮途径产生的双呋喃香豆素衍生物,能诱发原发性肝癌、免疫抑制以及机体氧化应激。但是,以AFB₁首先接触的消化道作为研究对象的研究较少,且报道不一。硒元素作为人和动物机体内所必需的微量元素,在一定剂量范围内有抗氧化、抗癌症和增强机体免疫力的功效。目前有关硒缓解AFB₁对机体造成的毒害作用的研究越来越引起人们的关注。但有关AFB₁引起雏鸡空肠黏膜细胞中过度凋亡以及硒对其产生拮抗作用的分子机制尚不完全清楚。本研究以亚硒酸钠作为硒源饲喂摄食AFB₁的肉雏鸡,用组织病理学、TUNEL染色法、流式细胞术和qRT-PCR等方法,研究空肠组织形态的结构变化、细胞凋亡变化以及死亡受体通路和内质网通路上相关调控因子的动态变化。本试验选用1日龄288只科宝肉鸡,随机分为4组（72只/组）,分别饲喂对照组日粮（0 mg/kg AFB₁,0.3 mg/Kg Se）、Se组日粮（0 mg/kg AFB₁,0.7 mg/Kg Se）、AFB₁组日粮（0.6 mg/kg AFB₁,0.3 mg/Kg Se）和AFB₁+Se组日粮（0.6 mg/kg AFB₁,0.7 mg/Kg）21天。其结果如下:组织病理学检验表明:仅在AFB₁组中观察到空肠绒毛尖端黏膜上皮细胞脱落,而对照组、Se组和AFB₁+Se组的肠绒毛则无明显的组织学损伤变化。在7、14和21日龄时,AFB₁组的绒毛高度、绒毛/隐窝比值和绒毛面积均显著或极显著低于对照组、Se组和AFB₁+Se组（p<0.01或p<0.05）;与对照组相比,Se组和AFB₁+Se组的上述指标均无显著性差异。TUNEL染色法检测结果显示,相比于对照组,AFB₁组中TUNEL阳性细胞数量在7、14和21日龄时均极显著地增多（p<0.01）。与AFB₁组相比,AFB₁+Se组中TUNEL阳性细胞数量在14和21日龄时显著减少（p<0.05）。此外,在21天的试验周期中,对照组和Se组二者之间的TUNEL阳性细胞数量无显著性差异（p>0.05）。流式细胞术检测结果显示,相比于对照组,AFB₁组中空肠细胞凋亡率在7、14和21日龄时极显著升高（p<0.01）;而与AFB₁组相比,AFB₁+Se组中空肠细胞凋亡率在14和21日龄时极显著降低（p<0.01）;此外,在整个试验周期中,Se组与对照组之间,空肠细胞凋亡率无显著性变化（p>0.05）。实时荧光定量PCR结果显示,在死亡受体通路中,相较于对照组,AFB₁组中FAS,TNF-α,TNF-R1,CASPASE-3和CASPASE-8的mRNA表达量在7、14和21日龄时均显著提高（p<0.05或p<0.01）;而FASL和CASPASE-10的mRNA表达量仅在14和21日龄时显著提高（p<0.05或p<0.01）。与AFB₁组比较,在AFB₁+Se组中FAS,FASL,TNF-α,CASPASE-3和CASPASE-10的mRNA表达量仅在14和21日龄时显著降低（p<0.05或p<0.01）;而TNF-R1和CASPASE-8的mRNA表达量在7、14和21日龄时均显著降低（p<0.05或p<0.01）。在内质网通路中,与对照组相比,AFB₁组中GRP78和GRP94的mRNA表达量在7、14和21日龄时显著升高（p<0.05或p<0.01）。在AFB₁+Se组中GRP78和GRP94的mRNA表达量相比于AFB₁组在14和21日龄时显著降低（p<0.05或p<0.01）。此外,在整个试验周期中,Se组与对照组之间,FAS,FASL,TNF-α,TNF-R1,CASPASE-3,CASPASE-8,CASPASE-10,GRP78和GRP94的mRNA表达量均无显著性变化（p>0.05）。综上所述,日粮中0.6 mg/kg AFB₁可阻碍雏鸡空肠黏膜的发育,引起FAS、FASL、TNF-α、TNF-R1、CASPASE-3、CASPASE-8、CASPASE-10、GRP78和GRP94 mRNA的表达上调,导致空肠黏膜细胞过度凋亡,而饲料中添加0.4 mg/kg硒可缓解这些变化。这表明AFB₁可能通过诱导死亡受体FAS/FASL或TNF-α/TNF-R1从而激活上游的CASPASE-8或CASPASE-10,进一步激活下游的CASPASE-3,最终通过死亡受体通路导致细胞凋亡;同时,AFB₁也可刺激内质网产生内质网应激,激活UPR反应,释放出GRP78和GRP94,引起二者的mRNA表达上调,最终长期的内质网应激引起了细胞凋亡。而日粮中添加硒后能抑制AFB₁对上述两条通路的激活,这可能是AFB₁导致雏鸡空肠黏膜细胞过度凋亡以及硒对其拮抗作用的分子机制之一。