低温保存对姬松茸菌株的碳氮利用能力和几种酶活性及同工酶谱的影响

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姬松茸是一类高温菌类,具有很高的药用价值,主要生长在夏秋两季,对温度要求较高,生长期较短,其菌丝在低温保藏条件下会发生自溶现象,为了更好的保藏姬松茸菌株,本试验以延边大学农学院微生物实验室培养的姬松茸纯菌种为试验材料,研究经不同处理后低温条件(4℃)对姬松茸菌株碳氮利用能力、酶活性以及低温条件下保存不同时间对姬松茸菌丝体内几种同工酶带(酯酶、过氧化物酶、蛋白酶)的影响,将姬松茸菌丝的生长速度测量及分析,针对上述同工酶进行了聚丙烯酸胺凝胶电泳试验,将酶活性及酶带迁移率进行对比分析。结果如下:1.经低温保存的姬松茸菌株,对于碳源的利用能力以葡萄糖最为稳定且生长速度最快,其次是蔗糖,说明在培养基中可用葡糖糖或蔗糖作为碳源;姬松茸菌株对于氮源的利用能力,以蛋白胨最为稳定且生长速度最快,其次是大豆蛋白胨,说明在培养基中可用蛋白胨或大豆蛋白胨作为氮源。姬松茸菌株在低温条件(4℃)保存,可加入20%海藻糖溶液作为保护液,对姬松茸菌株碳氮利用能力有提高作用。2.低温条件(48℃)保存对姬松茸菌丝多酚氧化酶酶活性影响大,对β-1,3-葡聚糖酶酶活性影响相对较小,以加入20%海藻糖溶液作为保护液的菌丝酶活性最高,其中β-1,3-葡聚糖酶酶活性基本接近与常温对照组,加入无菌水处理的菌丝酶活性低于未经任何处理的菌丝酶活性,说明加入无菌水低温保藏姬松茸菌株可使菌丝中的酶失活,而加入20%海藻糖溶液作为保护液则对酶活性有提高作用。3.低温条件(4℃)保存对姬松茸酯酶酶带影响较大,其低温处理时间越长酯酶酶活性越低,酶带颜色越浅;加入保护液后对菌丝酯酶酶活性有一定影响,同等时间的低温条件(4℃)下,未加入保护液菌株酯酶酶活性最高,加入20%海藻糖溶液处理后菌丝的酯酶酶活性高于无菌水处理,20%海藻糖溶液低温条件下对菌丝有保护作用。4.低温条件(4℃)保存对姬松茸过氧化物酶酶带有一定影响,随低温条件处理时间的延长过氧化物酶酶活性降低,酶带颜色变浅;加入保护液后对菌丝过氧化物酶酶活性有一定影响,同等时间的低温条件(4℃)下,未加入保护液菌株过氧化物酶酶活性最高,加入20%海藻糖溶液处理菌丝的过氧化物酶酶活性高于无菌水处理,20%海藻糖溶液低温条件下对菌丝有保护作用。5.低温条件(4℃)保存对姬松茸蛋白酶酶带有一定影响,加入保护液后对菌丝蛋白酶酶活性有一定影响,同等时间的低温条件(4℃)下,未加入保护液菌株蛋白酶酶活性最高,加入20%海藻糖溶液处理菌丝的蛋白酶酶活性高于无菌水处理,低温条件下出现新的蛋白酶酶带,其蛋白性质与低温关系尚需进一步研究。
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