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鼎湖鳞伞菌(Pholiota dinghuensis Bi)于1985年在我国广东省被发现,属于Pholiota属中的一个新品。药用真菌多糖经现代医学探究发现具有相当广泛的生物学活性,包括免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、降血糖、降胆固醇、抗炎、抗菌、保肝护肝、抗病毒和肠道益生等功效。近年来鼎湖鳞伞中的主要活性成分多糖引起了不少研究者的关注,结果表明鼎湖鳞伞菌丝体多糖具有显著的抗肿瘤活性,但至今关于它的免疫活性研究仍有限。本论文主要对鼎湖鳞伞菌丝体多糖(PDP)的分离纯化、基本理化性质、静态流变学特性及免疫调节活性等方面进行研究。主要研究结果如下:1鼎湖鳞伞菌丝体粗多糖制备及其流变学特性研究采用液体深层发酵制备鼎湖鳞伞菌丝体,再用热水浸提、乙醇沉淀的方法获得粗多糖。鼎湖鳞伞菌在葡萄糖45g/L,酵母膏6g/L,马铃薯100g/L,麦芽粉2.5g/L,无机盐KH2P041.5g/L及MgSO40.5g/L配制而成的发酵培养基中,以15%的接种量,于28 ℃、120 rpm的条件下培养10天后,测得鼎湖鱗伞菌丝体多糖产量约为429 mg/L。在静态流变学性质测试中,考察了浓度、温度、pH值、蔗糖及无机盐添加量(NaCl及CaC12)对其粗多糖溶液表观粘度的影响,结果表明粗PDP溶液的表观粘度随着多糖浓度的增加而上升,随着剪切速率的增加而快速下降,说明粗PDP溶液是假塑性流体(非牛顿流体);高温能降低多糖溶液的表观粘度;多糖溶液的表观粘度在pH=6～10的范围内保持稳定,而在强酸性条件下则明显上升;添加低浓度蔗糖具有增稠效果;粗PDP粘度随着CaC12浓度的增加而逐渐增大。2鼎湖鱗伞菌丝体多糖的提纯及理化性质分析利用DEAE凝胶阴离子交换柱对粗多糖进行初步分离,并采用Sephadex G-100凝胶色谱柱进一步纯化各个组分,得到三个组分PDP-1、PDP-2和PDP-3,其得率分别为 11.8%、44.7%和 1.04%。采用分子排阻高效液相色谱法对纯化组分PDP-1、PDP-2及PDP-3的纯度进行鉴定,结果表明PDP-1、PDP-2及PDP-3都是均一的多糖组分,平均分子量分别为1.50×106、1.42×106、1.01×106Da。利用苯酚-硫酸法、间羟联苯法、考马斯亮蓝法和氯化钡-明胶比色法检测多糖样品中所含的总糖、糖醛酸、蛋白质和硫酸基,结果表明鼎湖鳞伞菌丝体粗多糖、PDP-1、PDP-2和PDP-3总糖量分别为84.53%、93.48%、92.57%和64.86%;糖醛酸含量分别为 4.47%、2.06%、4.35%和 15.70%;蛋白含量为 1.69%、0.01%、0.04%和 3.49%;硫酸基含量为1.92%、0.81%、1.78%和2.25%。在所分析的三个多糖组分中,PDP-2糖醛酸及硫酸基的含量较高,而PDP-3蛋白质、糖醛酸及硫酸基的含量较高。采用高效液相色谱检测了粗PDP及纯化组分PDP-1、PDP-2、PDP-3的单糖组成。在菌丝体多糖的单糖组成中,葡萄糖含量均为最高,粗PDP和PDP-3的单糖组成较为复杂。其中PDP-3中可以检测到鼠李糖,而在PDP-1和PDP-2均没有,PDP-2及PDP-3中可以检测到岩藻糖、半乳糖,而PDP-1没有,且PDP-3的含量比较高。3鼎湖鳞伞菌丝体多糖的免疫调节活性通过RAW264.7细胞实验研究了粗PDP及纯化组分PDP-1、PDP-2、PDP-3的体外免疫调节活性,结果显示在各个多糖组分中,PDP-2和PDP-3表现出较好的体外免疫促进作用,有效地促进了 RAW264.7细胞的增殖,并显著提高其吞噬中性红能力及酸性磷酸酶活性。另外,PDP-3能有效提高细胞的NO释放量。采用环磷酰胺免疫抑制小鼠模型,探讨了 PDP-2的体内免疫调节活性及其协同抗氧化作用。结果表明,PDP-2能明显提高Cy免疫抑制型小鼠的脾脏指数、血清溶血素水平及血清、脾脏中的溶菌酶含量,还能协同增强小鼠肝脏中T-AOC、T-SOD、CAT和GSH-Px的酶活,降低MDA的水平。