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多囊卵巢综合征( PCOS)是一种以内分泌紊乱为主、多种代谢异常导致的异质性临床综合征。PCOS患者双侧卵巢有大量窦卵泡存在,但是不能周期性产生成熟卵泡,其病理机制尚不清楚。目前认为原发性、内在性卵泡生长异常可能是引起PCOS不排卵及临床内分泌改变的病理基础。研究表明,内在性的卵泡发育异常可能与卵巢颗粒细胞的凋亡调控失常有关。内质网应激(ERS)启动的凋亡途径是近年才发现的一种新的凋亡途径。通过激活未折叠蛋白反应(UPR)以保护由ERS所引起的细胞损伤,恢复细胞功能,但是如果损伤太过严重,内环境稳定不能及时恢复, ERS则引起细胞凋亡。DNA受到损害的卵巢颗粒细胞存在内质网应激标志性蛋白CHOP表达。在上述研究的基础上,本文探讨了多囊卵巢综合征患者卵巢颗粒细胞凋亡与PCOS的发病可能的相关关系。目的:旨在研究多囊卵巢综合征患者卵巢组织切片各级卵泡数和其颗粒细胞的凋亡情况,以及凋亡调控蛋白Bcl-2、Caspase3和内质网应激蛋白Bip、CHOP蛋白的表达。方法:选择因多囊卵巢综合征行卵巢楔形切除的卵巢病理组织21例,同时选择年龄相匹配并于卵泡期手术的非多囊卵巢综合征正常卵巢组织15例为对照组。(1) HE染色,采用双盲读片,比较两组中各级卵泡的数目;(2) 3-末端原位标记法(TUNEL)检测各级卵泡颗粒细胞的凋亡情况,比较两组凋亡率差异;(3)免疫组化法检测凋亡调控蛋白Bcl-2、Caspase3和内质网应激蛋白Bip、CHOP蛋白在各级卵泡颗粒细胞表达情况,比较两组间的差异。结果:1.PCOS组患者卵巢生长卵泡数增加光镜下病理学观察:由两位病理科主治医师采取双盲法在光镜下观察其病理结构,随机挑选10个视野(10×10),记录各级卵泡的数量。两组卵巢组织切片始基卵泡、闭锁卵泡比较,差异均无统计学意义;PCOS组过渡型初级卵泡、典型初级卵泡、次级卵泡、窦卵泡较对照组增多,差异有统计学意义(P<0.05)。卵泡计数:PCOS组较对照组初级卵泡增加1.8倍,次级卵泡数和窦卵泡增加1.6倍,尤其典型初级卵泡数增加约3倍。2.PCOS患者窦卵泡颗粒细胞凋亡率增加TUNEL法:每张切片随机取10个视野,观察窦卵泡中TUNEL染色阳性颗粒细胞占颗粒细胞总数的百分比值,即凋亡指数AI。两组卵巢组织切片显示始基卵泡、初级卵泡、次级卵泡颗粒细胞的凋亡率比较,差异无统计学意义;窦卵泡颗粒细胞凋亡率比较,PCOS组的凋亡率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。3.PCOS患者窦卵泡颗粒细胞凋亡调控蛋白Bcl - 2蛋白表达减少,Caspase3表达增加免疫组化:Bcl-2、caspase3蛋白主要表达于颗粒细胞的胞浆和胞膜,呈棕黄色,PCOS组窦卵泡颗粒细胞Bcl - 2蛋白染色强度高于对照组, Caspase3蛋白染色强度低于对照组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。4.PCOS患者窦卵泡颗粒细胞内质网应激标志性蛋白CHOP蛋白表达增加免疫组化:内质网应激标志性蛋白Bip蛋白主要表达于颗粒细胞的胞浆和胞膜,呈棕黄色; CHOP蛋白主要表达于颗粒细胞的胞核,以胞核呈棕黄色颗粒为阳性。窦卵泡颗粒细胞CHOP蛋白染色强度高于对照组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。BiP蛋白在PCOS窦卵泡颗粒细胞的染色强度高于对照组,比较差异无显著性。结论:PCOS组患者卵巢切片早期生长卵泡及窦卵泡数增加,窦卵泡颗粒细胞凋亡增加,凋亡调控蛋白和内质网应激标志性蛋白表达异常,提示PCOS患者卵巢颗粒细胞凋亡异常,内质网应激可能参与PCOS的发病。