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目的:研究人参皂甙Rg3对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖抑制作用,连接蛋白基因(Connexin26, Cx26)的表达及对细胞间隙连接通讯(Gap junction intercellular communication, GJIC)功能的影响,从而探讨人参皂甙Rg3抑制肿瘤细胞生长、转移潜能的可能机制,为临床肿瘤辅助治疗中应用人参皂甙Rg3提供理论依据。方法:体外培养人乳腺癌细胞株MCF-7,采用四甲基四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测人参皂甙Rg3对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖活力的影响;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测人参皂甙Rg3作用后Cx26表达情况;通过划痕标记荧光传输实验检测GJIC功能的恢复情况。结果:1.不同浓度的人参皂甙Rg3作用一定时间后,对MCF-7细胞增殖的抑制作用:人参皂甙Rg3在浓度为10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml、320μg/ml分别作用于人乳腺癌细胞株MCF-7。24h后抑制率分别为3.1%、5.2%、16.0%、26.3%、29.1%、50.4%。Rg3处理组与空白对照组比较,浓度为40μg/ml以上均明显抑制肿瘤细胞增殖(P<0.05);48h后抑制率分别为6.0%、12.4%、30.3%、60.6%、69.1%、74.0%,20μg/ml以上均有统计学意义(P<0.05)。作用时间上比较,24h和48h人参皂甙Rg3对肿瘤细胞的抑制率无统计学差异(P=0.051)。形态学分析,在倒置显微镜下可见,经药物作用后MCF-7细胞数目减少,细胞形态由原来的贴壁良好、饱满、多角形、梭形变为类圆形、悬浮、颜色变暗、无折光性,且随药物浓度的增加细胞形态变化越大。2.RT-PCR检测Rg3对基因Cx26的表达水平:各实验组和空白对照组分别作用MCF-7细胞24h后,提取各组细胞mRNA,然后进行PCR反应。在凝胶成像系统下观察:对照组和药物组均有Cx26基因、内参基因GAPDH的表达,经Lab-work软件分析对照组Cx26表达较药物组弱,在药物组随浓度增加(40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml)Cx26表达增强。方差分析:对照组与药物组浓度为40μg/ml、80μg/ml相比,无统计学差异(P>0.05);与浓度160μg/ml相比有显著的统计学差异(P=0.01)。药物组各个浓度之间比较:浓度160μg/ml分别与浓度40μg/ml、80μg/ml相比,均有显著的统计学差异(P<0.01),但是40μg/ml与80μg/ml这两个浓度组相比无显著差异(P>0.05)。3.划痕标记荧光传输实验Lucifer Yellow划痕标记荧光传输实验显示,对照组培养的MCF-7细胞,Lucifer Yellow荧光染色仅限于单个细胞。实验组经Rg3处理后Lucifer Yellow荧光通过细胞间隙连接传输至相邻细胞,形成片状荧光染色,人参皂甙Rg3作用后,肿瘤细胞的间隙连接通讯功能有所恢复。结论:1.人参皂甙Rg3对MCF-7肿瘤细胞有一定的抑制作用,并且随药物浓度的增加,对肿瘤细胞的增殖抑制能力增强。2.连接蛋白基因Cx26在药物作用前弱表达,经人参皂甙Rg3作用肿瘤细胞一定时间后,Cx26表达增强,并呈剂量依赖性,有显著的统计学差异。3.MCF-7肿瘤细胞经人参皂甙Rg3作用后,划痕标记荧光传输实验显示细胞间隙连接通讯功能有所恢复。4.Rg3通过提高肿瘤细胞的Cx26的表达,恢复肿瘤细胞间隙连接通讯功能,从而抑制肿瘤细胞的生长、转移,这可能是Rg3抗肿瘤作用机制之一。