重组人松弛素对舒张性心力衰竭模型兔心肌组织蛋白激酶G活性的调控研究

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[目的]随着社会老龄化问题日趋严重,舒张性心力衰竭(DHF)所占比重及发病率逐年提高,而松弛素今年近几年来发现具有心血管保护作用,我们既往研究已经发现松弛素可以改善DHF模型兔的舒张功能,但是其具体机制不明。藉此,我们探索人重组松弛素(RLX)对舒张性心力衰竭(DHF)模型兔心肌组织蛋白激酶G(PKG)活性的调控作用,旨在揭示重组人松弛素改善DHF舒张功能的病理生理机制,进一步为DHF的临床靶向治疗提供重要实验基础。[方法]1.采用腹主动脉缩窄术建立DHF模型兔,新西兰家兔42只随机分为假手术组(Sham组,6只)、DHF组(12只)、RLX小剂量组(12只)、RLX大剂量组(12 只)。2.术后8周,剔除术后死亡及不符合DHF诊断的家兔,经耳缘静脉注射给予RLX药物,RLX小剂量组为30μg/kg·d,大剂量组为98μg/kg·d,持续经兔耳缘静脉给药2周。3.术后第10周,取血清标本,分别采用酶联免疫吸附测定方法(ELISA)检测脑钠肽(BNP)、松弛素(RLX)浓度,制备10%心肌匀浆液分别采用ELISA方法检测3-硝基酪氨酸(3-NT)、一氧化氮(NO)、环磷酸鸟苷(cGMP)、蛋白激酶G(PKG)浓度。[结果]1.术后第8周,术后死亡共10只,不符合DHF标准共4只,均予以剔除,剩余28只纳入研究[假手术组(sham组)n=6,DHF组n=6,RLX小剂量=8,RLX大剂量=8]。2.与假手术组比较:DHF组、RLX小剂量组、RLX大剂量组血清钠尿肽、3-NT水平明显升高,NO、cGMP、PKG活性明显降低,差异有统计学意义(p<0.05);与DHF组比较:RLX大剂量组心肌匀浆中NO、cGMP、PKG活性明显升高[(18.70±0.27)μmol/Lvs(16.38 ± 0.16)μmol/L,(10.63 ± 0.34)nmol/Lvs(9.15 ± 0.27)nmol/L,(528.58±3.66)U/L vs(493.26±5.68)U/L,p<0.05],3-NT 水平明显降低(p<0.05)。而RLX小剂量组中NO、cGMP、PKG活性有升高趋势,但是差异无统计学意义(p>0.05),3-NT水平同样也有下降趋势,但是差异也无统计学意义(p>0.05)3.心肌Masson染色显示:RLX小剂量组、RLX大剂量组心肌间质纤维增生状况较DHF组均有不同程度减轻,其中改善最显著的是RLX大剂量组,表现为胶原纤维含量明显减少,心肌细胞内浸润的慢性炎症细减少,心肌细胞体积及胞质形态与假手术组最为接近。[结论]本研究结果证实大剂量RLX减轻家兔左心室舒张功能可能是通过NO-cGMP-PKG通路,减轻DHF模型兔氧化应激反应,提升NO生物学利用度、PKG活性,从而拮抗心肌纤维化,进而减轻左心室的舒张功能障碍。
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