杜仲叶抗疲劳活性成分的筛选及抗氧化性研究

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杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.),落叶乔木,是我国特种经济林木。杜仲味甘、微辛,性温,入肝、肾二经,具有补肝肾、壮筋骨的功效,其皮具有降血压、降血糖、降血脂等多种功能。大量研究表明杜仲皮与杜仲叶化学成分相似,为了有效利用资源,现多采用以叶代皮。虽然已有大量文献报道杜仲叶提取物具有抗疲劳作用,但是对其抗疲劳活性成分和作用机理的研究还很肤浅,尚未有实质性的进展和突破,至今仍存在功效成分不清,作用机理不明等问题。本课题针对上述问题,采用化学筛选与生物活性筛选相结合的方法,通过小鼠抗疲劳试验,对经由溶剂提取、大孔吸附树脂分离和溶剂萃取得到的各组分进行活性追踪,逐级筛选出具有高活性的有效部位和活性成分,并借助光谱分析等现代分析手段,对目的产物进行初步的结构分析。此外,通过体内、体外抗氧化试验,研究杜仲叶抗疲劳活性成分与其抗氧化作用的关系,探讨其作用机制,为开发以杜仲叶为功能性原料的第三代抗疲劳食品提供科学依据。试验主要研究成果:   1抗疲劳试验表明,杜仲叶经80%乙醇提取、XDA-8型大孔树脂吸附、乙醇梯度洗脱、溶剂逐级萃取后,得到20%乙醇洗脱部位和正丁醇萃取成分的活性较高,能显著延长小鼠负重游泳时间,降低血乳酸和血清尿素氮含量,提高肝糖原的含量。   2常压耐缺氧试验表明,杜仲叶提取物、一次分离纯化物和二次分离纯化物均未表现出显著性差异,推断杜仲叶抗疲劳活性与耐缺氧活性无关。   3体外抗氧化试验表明,具有抗疲劳作用的20%乙醇洗脱部位和正丁醇萃取成分均具有较好的清除·OH、DPPH和O2-·自由基的能力,并且其清除.OH及O2-·的效果优于Vc,可有效抑制脂质过氧化反应的进行。   4体内抗氧化试验表明,具有抗疲劳作用的20%乙醇洗脱部位和正丁醇萃取成分均能降低丙二醛的含量,提高超氧化物歧化酶的活性,据此推测杜仲叶抗疲劳作用机制可能与有效物质的体内抗氧化作用有关。   5通过逐级筛选和初步的结构分析,得到抗疲劳活性组分正丁醇萃取物主要为黄酮苷,此有效成分的抗疲劳作用与增加能量储备、减少过度运动后不良代谢物的生成、提高组织的耐受力以及清除运动中产生的大量自由基等作用有关。
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