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目的:探讨言内缺氧对新生大鼠海马CA3区神经元与神经胶质细胞的影响及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在缺氧后的表达与当归的调控作用。方法:选择健康雌性Sprague-Dsawley(SD)大鼠(220-250g)15只分别与一只雄性大鼠合笼配种,于第二日早晨发现阴栓记为雌鼠怀孕0d,记下日期,取出雄鼠,单独饲养雌鼠至孕期14d。将15只孕14d大鼠随机分为对照组(contrast group,CG)、缺氧组(hypoxia group,HG)和当归组(Angelica group,AG),每组各5只。自孕14d开始将缺氧组孕鼠置于三气培养箱中(氧浓度130mL/L,二氧化碳浓度0.3mL/L-0.4mL/L,温度25℃,相对湿度:75%-80%),缺氧2h/d,连续缺氧5d(孕14d-18d)。每天缺氧前1h经尾静脉注射生理盐水(8mL/Kg)。当归组则用250g/L的当归注射液代替生理盐水,余同缺氧组。对照组不缺氧,余同缺氧组。三组孕鼠待其自然分娩(第21d),每只孕鼠可产新生鼠5-8只,每窝随机选取新生鼠4只,取大脑组织(注:从取材后凡接触组织的水溶性试剂中均含0.1%的DEPC)、多聚甲醛固定,石蜡包埋、经海马横切面切片(厚4μm),作NES mRNA、GFAP mRNA、VEGF mRNA原位杂交步骤:①切片常规脱蜡至水。②胃蛋白酶消化,暴露核酸探针结合位点(18℃-23℃,胃蛋白酶浓度1.5mL3%柠檬酸加2滴胃蛋白酶,消化6min)。③1%多聚甲醛后固定。④滴加预杂交液,40℃3h。⑤滴加探针杂交液,加盖专用盖片,40℃过夜。⑥冲洗后滴加生物素化鼠抗地高辛,室温2h。⑦滴加生物素化过氧化物酶,室温30min。⑧滴加SABC-POD,室温30min。⑨DAB避光显色5-10min(镜下控制显色时间),⑩切片常规脱水、透明、封片,400倍拍照、IPP6.0软件分析各指标阳性细胞的积分光密度(integral light density,IOD)值,结果均以X±s表示。用SPSS16.0统计分析软件包进行统计分析(同一指标组间比较用单因素方差分析,两两比较用LSD检验)。结果:缺氧组新生鼠海马CA3区NSE mRNA原位杂交阳性细胞IOD值较对照组减小(P<0.05),当归组较缺氧组增大(P<0.05),均具有统计学意义:缺氧组GFAP mRNA原位杂交阳性细胞IOD值较对照组增大(P<0.05),当归组较缺氧组减小(P<0.05);缺氧组VEGF mRNA原位杂交阳性细胞的IOD值较对照组增大增大(P<0.05),当归组VEGF mRNA阳性细胞的IOD值也较缺氧组增大(P<0.05),均具有统计学意义。结论:①建立了较为科学、合理的胚胎大鼠宫内缺氧动物模型。②一定时间(2h/d,持续5d)、一定浓度(130mL/L)的宫内缺氧可使新生大鼠海马CA3区神经元减少,神经胶质细胞增生。③250g/L的当归注射液可增加缺氧所致的新生大鼠海马CA3区神经元的数量,减弱该区神经胶质细胞的增生,其机制可能是进一步上调缺氧后VEGF mRNA的表达,从而改善缺氧环境所致。