婴幼儿长段气道狭窄，是目前儿科重症监护室常见的诊疗难题，组织工程气管是目前新兴的治疗方法与研究热点。而成功的血管化是目前限制组织工程气管应用的难题。为此，学者们提出了各种促血管化策略。日本的学者研发的细胞膜片技术，具备体外预血管化的能力，并促进移植物与机体血运循环快速连接的优点。骨髓间充质干细胞（BMMSCs）在抗坏血酸的作用下也能形成相似的干细胞膜片（SCS）。其在组织工程化骨上已有广泛研究，而其在组织工程气管的血管化中，尚无相关研究。　　目的：　　探讨抗坏血酸体外构SCS的可行性，并通过体外诱导方式研究SCS的血管化潜能。结合本研究团队既往研发的脱细胞支架（DT），构建复合干细胞膜片的脱细胞组织工程气管支架（TET），进行体内移植实验，探索其血管化潜能，从而推动组织工程气管血管化的研究。　　方法：　　获取兔BMMSCs，经抗坏血酸诱导构建SCS，检测其组织结构，超微结构与细胞外基质的基因表达情况。通过体外添加血管内皮细胞培养基，对 SCS 进行血管化诱导，检测血管内皮细胞标志物的免疫组化与基因表达情况；同时在构建SCS的过程中添加血管生长相关因子，并进行上述检测。构建SCS与DT后，将其复合成TET，进行同种异体异位移植，探讨其在体内的血管化情况。　　结果：　　（1）在抗坏血酸（20 ug/ml）的作用下，经10-14天后BMMSCs可形成含有大量细胞外基质成分的膜片，透射电镜下见大量内质网与“囊泡样”结构。在细胞外基质的基因表达上，Fn的表达显著升高(P<0.05)，而Col-Ⅰ的表达虽稍提高，但差异无显著性意义。　　（2）在EGM-2的诱导下，BMMSCs与SCS在CD 31的免疫组化染色中均 呈阴性；在血管化相关基因的表达中， SCS 在 VEGF 上的表达显著提高（P=0.0065）。　　（3）在ECGS的诱导实验中， CD 31的免疫组化染色同样呈阴性结果；在　　血管化基因的表达中，抗坏血酸干预，可促进Ang-1基因表达的上调（P＜0.0001）；ECGS因子可促进Ang-2（P＜0.0001）、PDGF（P=0.0162）、Cox-2（P=0.044）的表达提高，而VEGF（P=0.0048）基因的表达下降。　　（4）移植实验后，未见明显的免疫排斥与感染坏死反应的发生。　　（5）TET移植后取出移植物，进行HE染色与免疫组化vWF染色后计数微血管密度（MVD），无论在2周还是4周时间点，TET组较DT组的MVD均显著增高（2周HE：P=0.014，4周HE：P＜0.0001；2周vWF：P=0.001，4周vWF：P=0.001）。而在不同组别内，2周与4周时，组内MVD无显著差异。　　结论：　　（1）抗坏血酸可促进BMMSCs细胞外基质成分的合成与分泌，且形成三维立体的细胞膜片结构，但其对细胞外基质存在一定的选择性。　　（2）在SCS的体外诱导中，未能形成具有血管网络的细胞膜片。但在抗坏血酸处理后其血管化诱导的潜能有所提高，在不同因子的作用下，不同基因的表达情况差异明显，干细胞膜片的血管化诱导仍需探索。　　（3）移植实验展现了干细胞膜片与脱细胞支架在组织工程中“免疫豁免”的巨大优势。且 SCS 具有促进脱细胞支架微血管形成的作用，展现了其在组织工程血管化中的光明前景。　　呈阴性；在血管化相关基因的表达中， SCS 在 VEGF 上的表达显著提高（P=0.0065）。　　（3）在ECGS的诱导实验中， CD 31的免疫组化染色同样呈阴性结果；在　　血管化基因的表达中，抗坏血酸干预，可促进Ang-1基因表达的上调（P＜0.0001）；ECGS因子可促进Ang-2（P＜0.0001）、PDGF（P=0.0162）、Cox-2（P=0.044）的表达提高，而VEGF（P=0.0048）基因的表达下降。　　（4）移植实验后，未见明显的免疫排斥与感染坏死反应的发生。　　（5）TET移植后取出移植物，进行HE染色与免疫组化vWF染色后计数微血管密度（MVD），无论在2周还是4周时间点，TET组较DT组的MVD均显著增高（2周HE：P=0.014，4周HE：P＜0.0001；2周vWF：P=0.001，4周vWF：P=0.001）。而在不同组别内，2周与4周时，组内MVD无显著差异。　　结论：　　（1）抗坏血酸可促进BMMSCs细胞外基质成分的合成与分泌，且形成三维立体的细胞膜片结构，但其对细胞外基质存在一定的选择性。　　（2）在SCS的体外诱导中，未能形成具有血管网络的细胞膜片。但在抗坏血酸处理后其血管化诱导的潜能有所提高，在不同因子的作用下，不同基因的表达情况差异明显，干细胞膜片的血管化诱导仍需探索。　　（3）移植实验展现了干细胞膜片与脱细胞支架在组织工程中“免疫豁免”的巨大优势。且 SCS 具有促进脱细胞支架微血管形成的作用，展现了其在组织工程血管化中的光明前景。