褐飞虱(Nilaparvata lugens (Stal))属半翅目,飞虱科,是一种典型的杀虫剂诱导的再猖獗害虫。杀虫剂刺激生殖是褐飞虱再猖獗的主要原因之一。在大多数昆虫中,脂肪体是卵黄蛋白原合成的主要场所。卵黄蛋白在脂肪体中合成,分泌到血淋巴后特异性吸入到成熟的卵泡中,作为胚胎发育的营养来源。以往关于褐飞虱生殖的研究多集中于卵巢,关于脂肪体的研究多集中于家蚕、果蝇、埃及伊蚊等模式昆虫,在褐飞虱中仍属首次。1、不同药剂处理后褐飞虱脂肪体的蛋白质组学分析为研究脂肪体在褐飞虱再猖獗机制中的作用,本研究利用iTRAQ技术对三唑磷和茚虫威处理的褐飞虱脂肪体进行了蛋白质组学研究,共鉴定到3431个蛋白质,与对照相比有685个差异显著。对这些差异蛋白进行功能分析,基于分子功能分12类,基于生物过程分22类。Pathway分析了502个差异蛋白,存在223条通路,包括代谢、免疫、信号、发育和生殖等各个方面。其中与卵母细胞直接相关的有两条,分别是卵母细胞减数分裂与孕激素介导的卵母细胞成熟。2、小G蛋白Ras对褐飞虱生殖力的影响三唑磷是引起褐飞虱再猖獗的典型的杀虫剂,蛋白质组学分析表明它能够引起褐飞虱脂肪体中Ras的表达量发生显著变化。这里利用饲喂法进行RNAi,敲除褐飞虱体内的NlRas基因,来观察生殖力的变化。与对照相比,经三唑磷处理的褐飞虱NlRas基因相对表达量上调78.64%,产卵量显著增加41.29%,卵巢和脂肪体的蛋白质含量分别高于对照54.78%和12.77%,卵巢和脂肪体的可溶性糖含量分别显著高于对照47.40%和94.12%。三唑磷处理的褐飞虱RNAi后,NlRas基因表达量无显著差异。敲除NlRas对褐飞虱的产卵量没有显著影响；卵巢蛋白质含量分别比对照和Cfp处理降低36.71%和20.24%；脂肪体蛋白质含量分别低21.79%和24.41%。敲除NlRas对褐飞虱卵巢的可溶性糖含量没有显著影响,却对脂肪体的可溶性糖含量有显著影响。敲除后脂肪体的可溶性糖含量显著低于三唑磷处理,减少了23.03%。3、依赖cAMP的蛋白激酶1(Pka)对褐飞虱生殖力的影响Pka可以调控卵泡细胞对卵黄蛋白原的摄取。蛋白质组学研究表明茚虫威处理后褐飞虱脂肪体内Pka含量下降。本实验利用饲喂法进行RNAi,敲除褐飞虱体内的NlPka基因,来研究生殖力的变化。茚虫威处理的褐飞虱雌成虫NlPka相对表达量显著低于对照,下调55.67%；产卵量无显著差异。药剂处理不显著影响卵巢的蛋白质含量但对脂肪体的蛋白质含量有显著影响,药剂处理的脂肪体蛋白质含量显著低于对照31.41%。药剂处理后褐飞虱卵巢的可溶性糖含量显著低于对照32.76%,但对脂肪体的可溶性糖含量没有显著影响。RNAi后褐飞虱雌成虫的NlPka相对表达量显著低于饲喂dsGfp处理组和对照组,分别下调51.60%和50.67%;产卵量分别比dsGfp和对照处理下降26.21%和27.14%。敲除NlPka对卵巢的蛋白质含量没有显著影响,但脂肪体的蛋白质含量分别低于对照和dsGfp35.54%和28.39%。敲除NlPka后褐飞虱卵巢的可溶性糖含量分别显著高于对照和dsGfp43.55%和54.56%；脂肪体的可溶性糖含量显著高于对照和dsGfp3.82%和62.46%。