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背景与目的卵巢癌是妇科三大恶性肿瘤之一,因卵巢深居盆腔,发病早期多无典型的临床表现,亦缺乏灵敏、特异的诊断方法,其发病机制亦不明确,多数病人发现患病时已为晚期,五年生存率仅为25%-30%,死亡率居妇科恶性肿瘤之首。因此,卵巢癌的发病机制仍是该领域的研究热点。Aurora-B是新近发现的Aurora激酶家族一员,是一种丝氨酸/苏氨酸磷酸化激酶,它参与细胞分裂,有研究表明其异常高表达与多种肿瘤的发生、发展紧密相关。存活素Survivin是抗凋亡抑制蛋白(inhibitors of apoptosis)IAP家族一员,有研究表明它在肿瘤组织中高表达,在绝大多数正常组织中低表达或者不表达。Survivin除抗凋亡功能外,也参与细胞周期调控,能够促进细胞分裂、增殖和血管形成。纺锤体的组装和定位,染色体的正确复制、分离,胞浆正确分离等都有赖于Aurora-B和Survivin的精确调节。关于Aurora-B和Survivin与卵巢癌关系的研究尚不多见。本研究应用免疫组织化学方法(SP法)和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法研究Aurora-B和Survivin在卵巢上皮性癌组织中的表达和分布情况,从而探讨两因子在卵巢上皮性癌发生、发展中的作用。材料与方法1实验标本：收集2009.6-2010.5在郑州大学第一附属医院手术切除并经病理证实的卵巢标本96例,包括正常卵巢上皮组织(以下简称正常组)18例,年龄40～78岁,平均(53.25±6.1)岁；卵巢良性上皮性肿瘤(以下简称良性组)36例,年龄19-63岁,平均(47.30±7.2)岁,包括20例浆液性肿瘤和16例粘液性肿瘤；卵巢恶性上皮性肿瘤(以下简称恶性组)42例,年龄22-86岁,平均(58.69±5.7)岁,包括32例浆液性肿瘤和10例粘液性肿瘤。按FIGO(2000年)分期,Ⅰ/Ⅱ期10例,Ⅲ/Ⅳ期32例；组织学分级(WH01973)高分化9例,中低分化33例；27例伴有淋巴结转移；28例伴有腹水。三组病例的年龄差异无统计学意义。所有标本均为首次发病,术前未经放化疗,所取标本一部分立即放入液氮超低温保存,并避免反复冻融。另一部分甲醛固定后,常规石蜡包埋。2实验方法：应用免疫组织化学方法(SP法)检测Aurora-B和Survivin在正常卵巢组织,卵巢良性上皮性肿瘤和卵巢恶性上皮性肿瘤组织中的蛋白表达水平,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测两因子在各组组织中的mRNA表达水平,比较各组表达水平的差异,并分析其与卵巢上皮性癌临床病理特征之间的关系。3统计学分析：数据统计采用SPSS16.0统计软件,定性资料采用x2检验或Fisher确切概率法,定量资料采用t检验、单因素方差分析法或Kruskal-Wallis检验,多组间比较采用Bonferroni法,相关性分析用Spearman秩相关和Pearson相关分析法。以α=0。05为检验水准,多组间比较时检验水准采用校正后的α,α=α/n(n为组间比较次数)。结果1 Aurora-B蛋白主要定位在卵巢恶性上皮性肿瘤细胞的胞核,胞浆偶有表达,其在恶性组中的阳性表达率为52.38%(22/42),在良性组中的阳性表达率为13.89%(5/36),在正常组中的阳性表达率为5.56%(1/18),三组间差异有统计学意义(x2=19.880,P=0.000),其中恶性组表达高于良性组(x2=12.690,P=0.000)、和正常组(x2=11.687,P=0.001),差异有显著意义,良性组和正常组表达无显著差异(P=0.651>0.017)。2 Aurora-B蛋白在Ⅲ-Ⅳ期卵巢癌组织中的阳性表达率(62.50%,20/32)明显高于Ⅰ-Ⅱ期(20.00%,2/10),(x2=3.945,P=0.047)；淋巴结转移组中阳性率(66.67%,18/27)高于无转移组(26.67%,4/15),(z2=6.185,P=0.013)；腹水组阳性率(64.29%,18/28)高于无腹水组(28.57%,4/14),(z2=4.773,P=0.029),差异均有统计学意义；而不同组织学分级分组中表达差异无统计学意义(高分化33.33%,3/9；中低分化57.58%,19/33),P>0.05。3 Survivin蛋白在恶性组中高表达,主要定位于胞浆,胞核偶有表达。恶性组(85.71%,36/42)、良性组(38.89%,14/36)、正常组(11.11%,2/18)中Survivin蛋白表达差异有统计学意义(x2=33.662,P=0.000),其中恶性组表达高于良性组(x2=18.471,P=0.000)和正常组(x2=30.198,P=0.000),良性组和正常组表达无显著差异(P=0.035>0.017)。4 Survivin蛋白在Ⅲ-Ⅳ期卵巢癌组织中的阳性表达率(93.75%,30/32)显著高于Ⅰ-Ⅱ期(60.00%,6/10),(P=0.021)；腹水组阳性率(96.43%,27/28)高于无腹水组(64.29%,9/14),(P=0.011)。Survivin蛋白在淋巴结有无转移分组中(92.59%,25/27 vs 73.33%,11/15)、不同组织学分级分组中(77.78%,7/9 vs 87.88%,29/33)表达差异均无统计学意义(P>0.05)。5在mRNA水平,Aurora-B.Survivin分别在1035bp、201bp处有特异性条带。两因子mRNA在正常组(Aurora-B:0.031±O.006,Survivin:0.113±O.014).良性组(Aurora-B:0.395±0.046,Survivin:O.584±0.048).恶性组(Aurora-B: 0.735±0.065,Survivin:O.978±O.103)三组间的表达差异均有统计学意义(P均<O.05)。Aurora-B mRNA和Survivin mRNA,在Ⅲ-Ⅳ期卵巢癌组织中的表达高于Ⅰ-Ⅱ期(Aurora-B O.734±O.035 vs 0.719±0.040；Survivin 0.976±0.098 vs O.965±0.125,P均<0.05),淋巴结转移组中表达高于无转移组(Aurora-B 0.723±O.039 vs O.714±O.024；Survivin 0.981±O.099 vs O.967±0.092,P均<0.051,有腹水组中的表达高于无腹水组(Aurora-B O.731±O.O17 vs 0.727±O.040；Survivin O.983±0.089 vs 0.968±0.092,P均<0.05),差异均有统计学意义,而在组织学分级高分化与中低分化中两因子mRNA表达无显著差异(Aurora-B 0.728±0.032 vs O.736±O.052；Survivin 0.959±0.031 vs 0.964±0.025,P均>0.05)。6在卵巢上皮性癌组织中,Aurora-B和Survivin蛋白相关系数r=0.339,P=0.001；两种因子mRNA相关系数r=0.740,P=0.000,提示两者成正相关。结论1 Aurora-B和Survivin在卵巢恶性上皮性肿瘤组织中高表达,且更多见于临床分期晚,伴有腹水和淋巴结转移的卵巢癌组织中,推测两因子可能与卵巢上皮性癌的发生、发展、浸润和转移有关。2两者在卵巢上皮性癌中的表达水平呈正相关关系,提示二者在卵巢上皮性癌的发生和发展中可能有协同作用。