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联合传统的化疗与新兴的基因疗法有可能作为一种治愈肝细胞癌（HCC）的途径。超过50%的肿瘤组织中都发现有p53基因的突变，若在肿瘤细胞内引入并表达p53基因，可以重启p53凋亡途径，对化疗药物如阿霉素（Dox）引起的基因损伤作出应答，促进癌细胞凋亡。基因和药物联合治疗存在的最大障碍是寻求一种安全性共传递载体，可加大基因的转染效率，并减少化疗药物对机体产生的副作用。作为骨骼和牙齿的主要无机成分，羟基磷灰石（HAp）以其优异的生物相容性和生物降解性备受亲睐，但是单纯的羟基磷灰石胞内转染效率低下，所以本课题以阳离子聚合物聚乙烯亚胺（PEI）修饰纳米HAp，共传递抗肿瘤基因p53和抗肿瘤药物阿霉素进入癌细胞，并进一步探究联合治疗于体内外对肝细胞癌的协同抑制效应。方法：1）制备一种新型纳米HAp，通过场发射扫描电镜（FE-SEM）、X射线衍射（XRD）、傅里叶红外光谱（FTIR）、透射电子显微镜（TEM）、选区电子衍射（SAED）、原子力显微镜（AFM）等方法对合成的纳米HAp颗粒形貌、粒径和结晶度等性质进行表征，并建立稳定的纳米HAp合成工艺路线。2）以聚乙烯亚胺对制备的纳米HAp进行表面修饰，生成纳米HAp与聚乙烯亚胺（HAp-PEI，简称HP）复合物，通过细胞凋亡检测试剂CCK-8分析并检测HAp与HP对肝癌细胞系HuH-7、Hep-3B、SMMC-7721和肝正常细胞系L-02的毒性。3）以HP负载重组质粒pEGFP-C1-p53转染L-02肝正常细胞和HuH-7、Hep-3B、SMMC-7721肝癌细胞，通过荧光倒置显微镜和流式细胞仪分析载基因颗粒HP-pEGFP-C1-p53（简写为HP-p53）于各细胞中转染效率。4）通过琼脂糖凝胶电泳、分光光度计评估HP对p53和Dox的装载能力；制备HP负载p53和Dox的混合纳米颗粒（HP-p53/Dox）,并通过生理盐水模拟体内环境分析HP-p53/Dox对p53和Dox的缓释作用。5）以荧光倒置显微镜观察HP-p53/Dox进入肝癌细胞后，p53和Dox是否可共定位于同一细胞内，并发挥联合抗癌作用。6）通过CCK-8分析并检测HP-p53/Dox在体外对肝癌细胞的凋亡作用；建立肝癌移植瘤模型，通过肿瘤的增长和小鼠体重的变化分析HP-p53/Dox在体内的抑癌效果。7）通过荧光倒置显微镜和CCK-8评估HP-p53/Dox对宫颈癌细胞HeLa和胰腺癌细胞PANC-1的转染效率及体外抑制效应。结果：1）制备的纳米HAp为棒状结构，长径为20-50nm，短径约为20nm，结晶度低，具有良好分散性；以PEI修饰HAp后得到HP纳米颗粒，对HAp的形貌和分散性没有影响，并且制备的HAp和HP在所取浓度范围内对肝正常细胞和肝癌细胞的活力几乎没有影响。2）转染肝癌细胞，结果显示HP-53对HuH-7具有有良好的转染效果，转染效率达到10.0%，已非常接近商用转染试剂TurboFect（10.7%）；对Hep-3B、SMMC-7721的转染效果次之，对L-02几乎无转染作用。3）HP可高效包封p53和Dox。100μL HP对p53的完全吸附量不小于6μg，对Dox的吸附量在16.85μg左右，而且HP-p53/Dox在体外有良好的基因、药物缓释效果。4）HP-p53/Dox经胞吞作用进入癌细胞后，p53和Dox可定位于同一细胞核，促进癌细胞凋亡，发挥联合抗癌作用。5）相较于单一p53（细胞活力约为99%）或Dox（细胞活力约为53%）处理，HP-p53/Dox联合处理组（细胞活力约为36%）在体外可显著增强肝癌细胞的凋亡；在体内实验中，与对照组相比（肿瘤增长约为24倍），HP-p53/Dox组（肿瘤增长约为6倍）的小鼠肿瘤在体内可显著抑制肿瘤生长，并维持实验小鼠体重的稳定，增强小鼠的生理机能。6）HAp和HP在所取浓度范围内对HeLa和PANC-1的细胞活力无显著影响，HP-53在两种癌细胞内有较好的转染作用，并且HP-p53/Dox可增强HeLa和PANC-1的凋亡作用。