论文部分内容阅读
目的检测胶质瘤组织中自噬相关因子LC3的表达及CD68+小胶质细胞、CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞的浸润情况,分析自噬相关因子LC3的表达与CD68+小胶质细胞、CD4+ T淋巴细胞和CD8+ T淋巴细胞浸润的相关性及临床意义。材料与方法收集自2010年01月至2013年01月在滨州医学院附属医院选择手术治疗的有完整临床病理资料的43例胶质瘤石蜡标本和2016年01月-2018年01月在我院接受手术治疗的25例胶质瘤患者的新鲜手术标本,取胶质瘤切除术过程中必须切除的正常脑组织作为对照,将新鲜胶质瘤组织标本及正常脑组织标本分别置于液氮中冻存、备用。所有患者术前均未进行放疗、化疗及其他形式的治疗,且无全身免疫系统相关疾病及其他严重的慢性疾病。通过滨州医学院附属医院回访中心或电话随访石蜡标本患者,筛选术后治疗方案基本一致的病例并收集完整的随访数据。分别采用Real-time PCR、免疫组化、Western Blot检测自噬相关因子LC3在胶质瘤组织和正常脑组织中的表达情况;应用免疫组化对各标本组织中CD68+小胶质细胞、CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴进行染色并计数;使用Spearman相关性分析法对自噬相关因子LC3的表达与CD68+小胶质细胞、CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞浸润的关系进行分析;各临床病理因素与LC3、CD68+小胶质细胞、CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞的关系采用χ2检验;采用Kaplan-Meier分析LC3、CD68+小胶质细胞、CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞的表达或浸润对胶质瘤患者预后的影响。结果1.Real-time PCR、免疫组化和Western Blot检测结果一致,均显示自噬相关因子LC3的在正常脑组织中呈低表达,在低级别胶质瘤组织和高级别胶质瘤组织中呈不同程度的升高,且高级别胶质瘤明显高于低级别(P<0.05)。2.免疫组化检测结果表明:CD68+小胶质细胞、CD4+ T淋巴细胞和CD8+ T淋巴细胞在胶质瘤组织中浸润的数量明显高于正常脑组织(P<0.05),且高级别胶质瘤组织中浸润的数量明显高于低级别胶质瘤组织(P<0.05)。3.Spearman分析结果表明:在低级别和高级别胶质瘤中,自噬相关因子LC3的表达与CD68+小胶质细胞、CD4+ T淋巴细胞及CD8+ T淋巴细胞的浸润均呈正相关,低级别中相关系数分别为0.227,0.140,0.279(P<0.05),高级别中相关系数分别为 0.303,0.221,0.395(P<0.05)。4.χ2检验显示:自噬相关因子LC3的表达及CD68+小胶质细胞、CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞的浸润均与肿瘤的病理分级有关(P<0.05),分级越高其表达或浸润越高。5.Kaplan-Meier法生存分析表明:在低级别胶质瘤中,自噬相关因子LC3的表达和CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞的浸润均与患者的预后呈正相关(P<0.05),CD68+小胶质细胞的浸润与患者的预后呈负相关;在高级别胶质瘤中,LC3的表达和CD68+小胶质细胞、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞的浸润均与患者的预后无关(P>0.05)。结论1.胶质瘤中LC3的表达及CD68+小胶质细胞、CD4+ T淋巴细胞和CD8+ T淋巴细胞的浸润均与病理学分级有关。2.胶质瘤中LC3的表达与CD68+小胶质细胞、CD4+ T淋巴细胞和CD8+ T淋巴细胞的浸润均呈正相关,提示自噬水平的变化可能是影响胶质瘤细胞免疫的因素之一。3.低级别胶质瘤中,LC3的表达、CD4+T淋巴细胞的浸润及CD8+T淋巴细胞的浸润均与患者的预后呈正相关;CD68+小胶质细胞的浸润与患者的预后呈负相关。