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本实验以15℃、35℃和55℃三种不同温度的厌氧烃降解富集物为接种物，通过添加抑制乙酸营养型产甲烷菌生长的抑制剂NH4Cl和CH3F，探究在这三个温度的烃降解富集物中是否存在乙酸互营氧化过程。以35℃烃降解富集物为接种物探究不同浓度的硫酸盐对正十六烷的厌氧降解的影响。采用不同的提取方法提取DNA、采用不同的缓冲液维持pH，研究这些不同的处理手段对富集物中的群落结构是否造成影响。研究结果如下：（1）五种方法得到的细菌和古菌的群落结构的组成比较相似，说明这几种提取方法对群落结构的组成影响不大，但是对某些片段的相对丰度会有一些影响。（2）发现PB组的乙酸降解产甲烷延滞期约40天，显著高于添加其他组的20-24天（p <0.05）；添加NaHCO3/CO2组的乙酸降解转化为甲烷的比例为88.3±0.5%，显著高于其他组的77-81%（p <0.05）；添加不同缓冲液组中的最大甲烷比生长速率都在0.46-0.57d-1（p>0.05）；添加NaHCO3/CO2的细菌群落变化明显，主要是一类未培养细菌（unclassified bacteria）、Spirochaetaceae科细菌和未培养WWE1类群的丰度分别增加到15.5±9.4%、7.3±4.6%和17.6±6.3%，而Synergistaceae科的细菌丰度降低到8.9±8.1%。AC+PB组中的古菌类群发生了明显变化，由Methanosaeta harundinacea相关的产甲烷古菌占主导（97±2%），而在添加HEPES、PIPES和NaHCO3和不加缓冲液组中同时存在两个种的氢营养型产甲烷古菌Methanosaeta harundinacea和Methanosaeta concilii，以及属于Methanobacteriales的氢营养型产甲烷古菌。（3）实验室富集的低温、中温和高温正十六烷烃降解产甲烷菌系Y15、M82和SK都可以利用乙酸生长，但是添加乙酸营养型产甲烷古菌的抑制剂NH4Cl和CH3F，Y15几乎全由Methanosaeta组成；M82的群落结构未发生显著变化，主要由Methanosaeta和Methanoculleus组成；而SK的古菌群落从Methanosaeta为主演替为Methanthermobacter为主。这些研究表明高温石油烃降解产甲烷过程中可能存在乙酸互营氧化产甲烷代谢过程。（4）发现中温产甲烷菌系M82可以在硫酸盐浓度为0.5-25mM条件下降解正十六烷烃产生甲烷，当硫酸盐浓度达到15-25mM，甲烷产生速率与甲烷产量显著降低。分析群落结构，发现不同硫酸盐浓度条件下，细菌群落结构并没有发生显著变化，而0.5-10mM硫酸盐条件下，古菌群落结构相似，优势片段是T-RF495bp，而在15-25mM硫酸盐条件下，优势片段逐渐演替为186bp。中间代谢产物GC-MS分析发现Hex在M82菌系中降解途径和SO42-的浓度关系不大，这种代谢途径有可能是一种新的代谢途径。