哈维氏弧菌噬菌体的分离及其生物学特性

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哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)是多种海水养殖动物的主要致病菌,可以导致养殖动物的皮肤、肌肉溃烂和内脏坏死进而使水产养殖动物大量死亡,造成巨大的经济损失。抗生素可有效防治水产动物细菌性疾病,然而长期持续地或大剂量使用抗生素类药物防治水产养殖动物细菌性病害,会导致水产品药物残留、细菌耐药性、环境污染等问题,如何安全高效地防治细菌疾病已成为水产动物病害防控领域的一个重点。噬菌体(bacteriophage,phage)作为一种具有高效特异裂解性、专一宿主性、自我增殖能力强、给药方式多、无药物残留、不形成耐药性等优点的产品,将成为替代抗生素用于水产动物疾病防治的绿色产品之一。本论文旨在针对特定的海水养殖病原菌一哈维氏弧菌,分离不同的烈性噬菌体,通过研究噬菌体的生长特性和生物学特征,探讨利用噬菌体来防控水产动物弧菌病的潜力。本试验从不同海区采集海水样品,包括厦门环岛近岸、东山岛及宁德养殖海区,利用双层平板法分离哈维氏弧菌噬菌体,并采用透射电子显微镜观察其形态特征。本实验共得到12株噬菌体纯株(2株肌尾噬菌体、2株短尾噬菌体、8株长尾噬菌体),其中短尾噬菌体在哈维氏弧菌噬菌体中鲜有发现。12株噬菌体的宿主范围及一步生长曲线检测结果显示,哈维氏弧菌噬菌体普遍具有高裂解性以及相对较窄的宿主范围。之后,本文选取了 5株具有较高裂解能力的噬菌体,深入研究噬菌体在不同环境条件下(温度、pH)的稳定性,以探讨噬菌体在实际环境中的应用潜力。结果表明,5株噬菌体的温度适应性较低,在60℃条件下,噬菌体完全失去侵染裂解宿主细菌的能力;而对pH的适应性较广,在正常海水pH条件下噬菌体活性无改变,能够耐受5-10以内的酸碱性变化。不同环境条件稳定性测试结果表明分离得到的噬菌体具备优良的应用潜能。综上所述,本试验中通过分离得到12株哈维氏弧菌噬菌体,并筛选出裂解能力强、理化性质稳定的噬菌体,为噬菌体实际使用提供了基础材料。同时,综合现有数据表明,其中短尾噬菌体具有一定的研究意义,可用于深入探究噬菌体与宿主之间的相互关系。
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