聚阳离子改性缩醛基纳米药物递送系统pH响应性的研究

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近年来,随着纳米技术与纳米材料的不断发展,刺激响应性生物材料被广泛的开发并应用于可控药物递送。肿瘤细胞由于快速的新陈代谢较正常细胞具有更低的pH环境。通过设计具有pH响应性的材料,可以实现药物精准可控的释放,继而降低毒副作用。本文基于单体甲基丙烯酸(2-羟甲基-2-甲基-丙二醇肉桂缩醛)酯(CQMA)、N-(2-羟乙基)六亚甲二胺甲基丙烯酸乙酯(AEMA)和甲基丙烯酸二甲氨基乙酯(DMAEMA),制备一系列pH响应两亲性聚合物,探究聚阳离子对缩醛基纳米药物递送系统的pH响应性的影响。本文首先以CQMA和AEMA为共聚单体,以三硫代碳酸酯(DTM)修饰的聚乙二醇单甲醚为大分子可逆加成-断裂链转移(RAFT)试剂制备了AEMA含量不同的四种mPEG113-b-(PCQMAx-co-PAEMAy)(PECAE-z,z=0~3)两亲性嵌段聚合物。采用纳米沉淀法和透析法在不同pH条件下制备(PECAE-z-pHx)纳米粒以及负载DOX的(PECAE-z-pHx(DOX))纳米粒。DLS和TEM结果显示,纳米粒的粒径随着阳离子的含量增加而增大,随着制备时环境的pH降低而增大。pH 7.4条件下制备的纳米粒具备更好的药物负载能力,且具有较低的临界胶束浓度。pH响应性实验表明,疏水段中PAEMA的含量越高,CQMA中肉桂醛的水解越快,不同制备条件下纳米粒的水解行为相似,且pH 6.5条件下制备的纳米粒的水解速率更快,但是两种纳米粒的崩解途径是不一样的。细胞毒性实验表明,键接了肉桂醛的空白材料的细胞毒性一定范围内随肉桂醛浓度增大而升高,随阳离子浓度增大先升高再降低。肉桂醛可以抑制DOX的耐药性,明显的提高肿瘤抑制效果。细胞胞吞显示6.5条件下制备的纳米粒有利于细胞内化。负载DOX的PECAE-2-pHx纳米粒表现出更好的细胞胞吞和细胞毒性。RNA干扰疗法能够有效的抑制靶基因表达,从而实现治疗目的,但是其逃逸效率非常低,为了提高RNA的逃逸效率,本文以mPEG45-DTM为RAFT试剂制备了一系列CQMA和DMAEMA不同比例的三嵌段聚合物mPEG45-b-(PCQMAx-co-PDMAEMAy)-b-DMAEMAz(DDCE-0~3)。在pH 7.4条件下,通过纳米沉淀法制备粒径均一、稳定性良好的DDCE纳米粒。pH响应性实验表明,疏水段中PDMAEMA的引入对CQMA的水解有明显的促进作用,且含量越高水解越快;阳离子含量相同时,PCQMA含量的增加导致疏水内核过于紧密,继而抑制了其水解。粒径变化与水解结果相吻合。凝胶电泳实验证明嵌段的阳离子段达到一定的含量,且载体/siRNA的质量比为10:1时,能有效的负载基因。细胞毒性实验表明,负载siRNA的纳米复合物具有良好的细胞相容性。
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