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从湖南浏阳、桂阳、宁乡、宁远、石门、龙山、凤凰和云南玉溪、曲靖等赤星病病区采集植株下部的45张健康烟叶,分离到的676株烟草叶围菌株。利用平板对峙法测定分离菌株对烟草赤星病菌的拮抗作用,结果表明,16株菌株对烟草赤星病菌有拮抗作用,其中菌株19,29对烟草赤星病菌的抑制带在10.0 mm以上,且对病菌孢子的萌发也有抑制作用。经形态和生理生化测定,19和29菌株分别被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和短芽孢杆菌(Bacillus brevis)。拮抗菌19和29菌株生长的最适pH值为7.0。19菌株的最佳发酵培养基为:豆饼粉25‰、鱼粉3‰、CaCO3 4‰、KH2PO4 0.7‰,最佳发酵温度为30℃,发酵时间26h,接种量3%,在150mL的三角瓶中装80mL培养基;菌株29的最佳发酵培养基为:豆饼粉20‰、鱼粉3‰、CaCO3 3‰、KH2PO4 0.8‰,最佳发酵温度28℃,发酵时间24h,接种量4%,在150mL的三角瓶中装80mL培养基。19和29菌株的发酵液能诱导烟草体内的抗性相关酶如过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)酶活性的增加。用利福平作叶面拮抗菌19和29菌株的抗性标记,检测19和29菌株在烟叶上定殖情况,结果表明,这两株菌株可在烟叶上定殖。19和29菌株对烟草赤星病的防治效果,离体试验的平均防效分别为74.3%和78.0%,室内试验的平均防效分别为81.51%和79.71%,大田试验的平均防效分别为56.79%和66.71%。