由致病性桑丁香假单胞菌（Pseudomonas syringae pv.mori）引起的桑疫病是我国一种严重的作物病害。由于缺乏有效的防控措施,该病害每年给我国造成较大的经济损失。近年间,早期诊断技术作为植物病害防控的重要手段渐趋流行,通过对病原菌进行早期检测,提前预测病害疫情的严重性,从而制定合理有效的防治措施。建立了一种快速筛选致病性桑丁香假单胞菌的方法。首先依据经低温处理之后的致病性桑丁香假单胞菌能产生稳定荧光效应进行初筛,然后通过检测特异性的hrpZ致病基因进行复筛,最后根据回接验证,细胞形态学和16S-rDNA分子生物学鉴定,从而得到Psm13-7、Psm14-1、Psm14-7、Psm15-2四株能引起典型桑疫病症状的致病菌株。整个分离筛选过程仅仅花费15 d左右的时间,与传统方法相比,分离时间缩短了近60天,分离效率提高了70%。该方法的成功构建为丁香假单胞其他致病变种菌株的分离筛选提供可靠的参照依据。利用特异性地引物对,构建了致病性桑丁香假单胞菌的荧光定量PCR检测方法。通过将致病性桑丁香假单胞菌与其他致病变种的丁香假单胞菌进行hrpZ致病基因的差异性片段分析,设计筛选了一对适宜快速检测致病性桑丁香假单胞菌的特异性引物对Psm240F/Psm434R。经过琼脂糖凝胶电泳,结果表明该引物对可从致病性桑丁香假单胞菌中扩增出大小为195 bp的DNA片段,而对其他致病变种的丁香假单胞菌及其他种属的病原菌均没有扩增。以致病性桑丁香假单胞菌全基因组DNA和菌悬液分别为模板进行荧光定量PCR检测,在6×10^-56 ng/μL浓度范围内,DNA浓度与Ct值呈现良好的线性关系,线性方程为y=-3.224 69 x+14.034 45,R²=0.99709,最低检测限为60 fg/μL,在10²¹0⁸ CFU/mL浓度范围内,菌液浓度与Ct值呈现良好的线性关系,线性方程为y=-4.56215 x+46.91167,R²=0.98872,最低检测限为10² CFU/mL。该方法的成功构建为桑疫病的早期诊断提供了可靠的技术支持。利用叠氮溴化丙锭（Propidium Monoazide,PMA）耦合荧光定量PCR方法,构建了致病性桑丁香假单胞菌的活体定量方法。通过对该致病菌细胞悬浮液进行预处理,使用浓度为20 ng/μL的PMA,黑暗孵育10 min,曝光10 min,可完全抑制浓度为10⁸CFU/mL死菌中的DNA,且不会对活菌DNA的扩增造成影响。在10¹¹0⁸ CFU/mL浓度范围内,PMA-qPCR的Ct值与菌浓的对数呈良好的线性关系,线性方程为y=-3.57193+46.04443,R²=0.99721,最低检测限为10¹ CFU/mL。将该方法应用于桑疫病致病菌的活体检测,可大大降低对桑疫病疫情的错误评估。本文建立了桑疫病致病菌的活体检测方法,为桑疫病的早期检测和有效防控提供了一种新的技术支持,对减少桑疫病造成的损失和保障蚕桑行业可持续发展具有重要的现实意义。