过度训练是机体长时间大负荷训练导致的机体疲劳和机能下降，且不能在短时间内恢复，是运动性疲劳的连续积累所致。大强度运动训练时，机体细胞会产生氧化应激反应。大量研究证实，骨骼肌是运动诱导自由基产生的主要场所,并且运动诱导骨骼肌细胞产生的自由基最主要的是超氧阴离子（superoxide anion，O-2）和一氧化氮（nitric oxide, NO）,二者可以发生快速非酶促化学反应，生成过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite, ONOO-）。ONOO-是比O2-更强的氧化剂，能介导更强的氧化应激损伤，可能是导致运动性疲劳的关键因素，但是过度训练诱导骨骼肌ONOO-产生的机制尚不清楚。本研究通过对游泳训练小鼠注射NADPH氧化酶抑制剂apocynin构建实验模型，探讨过度训练诱导骨骼肌ONOO-生成的机制。研究方法：64只小鼠随机分为6组：安静对照组（C组）、对照+药物组（CA组）、游泳训练组（T组）、游泳训练+药物组（TA组）、过度训练组（OT组）、过度训练+药物组（OTA组）。T组采用无负重游泳训练，OT组采用1~5%体重尾部负重，60分钟游泳训练，1次/天，6天/周，共8周；取样前连续2天注射NADPH氧化酶抑制剂apocynin（10mg/kg体重）。研究结果：（1）经过8周训练，各训练组小鼠体重均低于对照组，过度训练组小鼠体重在第8周显著下降；各训练组小鼠Hb浓度显著降低（P<0.05）；（2）小鼠经8周游泳训练，末次运动24h后， T组与OT组均见骨骼肌NADPH氧化酶活性增加（P<0.01），OT组较T组增加更高（P<0.01）；（3）T组和TA组骨骼肌iNOS表达极显著增加（P<0.01）；OT组与OTA组iNOS和nNOS表达均极显著增加（P<0.01）；（4）OT组骨骼肌ONOO-极显著增加（P<0.01），而OTA组与普通训练组ONOO-未见明显变化。研究结论：（1）长期耐力训练增加骨骼肌NADPH氧化酶活性，并且运动强度越高，该酶活性增加越高。（2）过度训练增强骨骼肌iNOS、nNOS蛋白表达。（3）过度训练诱导骨骼肌NADPH氧化酶产生ROS，后者与骨骼肌iNOS和/或nNOS催化生成的NO反应，进而导致过量ONOO-的生成。