哺乳动物细胞是表达具有天然活性蛋白的重要宿主，而中华仓鼠卵巢细胞(CHO)是用于真核基因表达的最成功的哺乳动物细胞。但在该细胞中重组蛋白的产量较低，这一直是影响其更广泛应用的一个问题。人们已在选择合适的表达载体和有效的启动子和增强子方面做了大量工作，取得很多进展，同时开始关注外源基因与中华仓鼠卵巢细胞密码子的匹配程度对外源基因表达的影响，因为人们注意到在大肠杆菌和酵母表达系统中，很多实验已经证实在不改变外源基因氨基酸顺序的条件下，尽量使用大肠杆菌和酵母的偏爱密码子，可明显提高外源基因的表达水平。因此研究CHO细胞密码子使用特点，将为从偏爱密码子角度来探索不同外源基因在CHO细胞表达水平提供新思路，为外源基因在CHO细胞中的高表达奠定理论基础。 中华仓鼠卵巢细胞，是高度特异化细胞，我们目前常用于表达的CHOdhfr细胞株是野型CHO传代细胞经多次诱变的营养缺陷型细胞。而从GenBank中获得的来自中华仓鼠卵巢细胞中cDNA序列数量有限，因此要研究密码子使用特点就需要构建中华仓鼠卵巢细胞cDNA文库以获得更多数量的cDNA序列。本文选取生长旺盛的CHO dhfr细胞，提取高丰度mRNA，合成cDNA连接到pUC18中，建立适用于高丰度mRNA的质粒cDNA文库。根据以前的研究结果，偏爱密码子的选择与基因长短无关，因此随机挑选150个克隆，每个克隆测一个反应平均长度在550bp左右。通过BLAST程序，去除假基因，tRNA和rRNA基因，重复序列基因，非编码区核苷酸序列，重复的cDNA序列等，最后剩下50个合格的编码蛋白质cDNA序列。