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周围神经损伤在骨科是一种常见的致残性疾病。周围神经损伤后往往伴有神经的缺血缺氧性损伤,特别是挤压伤后。神经再生的过程实际上是受损神经元形成新的轴突或轴突的生长延长,再与靶器官重建突触连接并恢复其正常功能的过程。加快周围神经损伤后轴突的再生,对提高临床周围神经损伤修复后疗效具有重要意义。免疫抑制药物他克莫司(FK506)已被发现在异体手移植的病人上体现出促神经生长的“副”作用,并已表明在实验模型中具有神经保护和神经营养作用,在体内外实验中能增加神经突起的延长和促进神经再生速率。NGF已经被公认在神经损伤后神经再生方面具有神经营养和神经保护作用。本文通过构建神经细胞缺氧模型,研究了他克莫司(FK506)对神经元突起生长的影响,探索了FK506协同神经生长因子(NGF)对神经元突起生长的促进作用,经过一系列的对比实验,筛选出最佳药物配比浓度。进一步定量检测不同浓度FK506在常氧与缺氧状态下,分别对PC12(类神经细胞研究模型)细胞突起生长的影响。并通过蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测FK506在常氧与缺氧时对PC12细胞HSP70(热休克蛋白70)、HIF-1ɑ(缺氧诱导因子)表达的影响,探讨FK506保护缺氧性神经元受损的可能性机制。结果表明:在缺氧及常氧状态下,FK506在1-1000 nmol/L均可协同NGF促进PC12细胞突起的生长,其中FK506 100 nmol/L与NGF10ng/ml对缺氧后PC12细胞突起生长的协同作用更明显。100 nmol/L FK506与10ng/ml NGF对相关蛋白表达具有促进作用,100 nmol/L FK506对PC12细胞具有缺氧保护作用,其抗氧化损伤的作用可能与促进HSP70、HIF-1ɑ的表达有关。该研究对促进周围神经再生速率及对神经受损后缺氧性损伤的治疗具有重要的临床意义。