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月季(Rosa hybrid)切花为世界“四大切花”之首,但其采后易发生花瓣和叶片的水分散失,并严重影响其观赏品质和经济价值。水孔蛋白(aquaporins,AQPs)作为质膜和液泡膜等生物膜上快速转运水分子的通道蛋白,可参与植物气孔运动。叶片气孔被认为是植物水分散失的主要途径,并受到光及植物激素等重要因子的调控。本论文以月季‘影星’切花为试材,首先就该切花PIPs和TIPs基因进行了克隆及生物信息学分析,然后分别研究了植物激素脱落酸(abscisic acid,ABA)和新型植物生长调节剂表油菜素内酯(epi-brassinolide,EBR)外源处理对该切花叶片气孔开放、水分散失以及PIPs和TIPs基因表达的影响。主要结果如下:1.克隆得到4个质膜AQPs基因(RhPIP1;1、RhPIP1;2、RhPIP2;1和RhPIP2;2)的cDNA全长和4个液泡膜AQPs基因(RhTIP1;1、RhTIP1;2、RhTIP2;1和RhTIP4;1)的cDNA全长及部分基因组序列,序列长度依次为991、1056、1118、1161、978、960、1080和910 bp,分别含有873、861、855、762、765、762、747和750 bp的完整开放阅读框(ORF),并编码290、286、284、253、254、253、248和249个氨基酸,均含有MIP家族的保守序列及NPA盒。2.外源ABA处理可抑制光诱导的月季切花离体叶片气孔开放,并随着ABA浓度增加,对气孔开放率和气孔开度的抑制效果明显增强,其中以100μmol L-1 ABA处理效果最佳。另外,ABA处理可明显降低月季切花离体叶片的失水量。3.采用EBR浸泡及配合光/暗处理月季切花叶片表皮条或离体叶片的一系列试验得知,0.050.10μmol L-1 EBR可促进叶片光下的气孔开放和抑制暗中的气孔关闭,而0.55.00μmol L-1 EBR则可抑制叶片光下的气孔开放和促进暗中的气孔关闭。另外,测定EBR处理对月季切花离体叶片失水量的影响表明,0.10μmol L-1 EBR处理的失水量明显高于对照(蒸馏水处理),而5.00μmol L-1 EBR处理的失水量则显著低于对照及低浓度EBR处理。据此认为,EBR对月季叶片气孔开闭的影响取决于其处理浓度,低浓度EBR处理可促进光下气孔张开和抑制暗中气孔关闭,而高浓度EBR处理则可抑制光下气孔开放和促进暗中气孔关闭。4.采用实时定量PCR(qPCR)分析ABA和EBR处理对月季切花叶片8个AQPs基因表达的影响,结果如下:(1)与对照(蒸馏水处理)相比,100μmol L-1 ABA处理使8个AQPs基因均呈下调表达;(2)0.10μmol L-1 EBR处理后,RhPIP1;1和RhTIP4;1呈下调表达,RhPIP2;2、RhTIP1;1和RhTIP2;1呈上调表达。而5.00μmol L-1EBR处理后,RhPIP1;1呈现下调表达,RhPIP2;2、RhTIP1;1和RhTIP2;1呈上调表达。