第一部分溃疡性结肠炎癌变机制的研究研究背景：结直肠癌是世界范围内的第三大常见癌症,占男性癌症相关死因的第三位,女性第二位。流行病学研究显示慢性炎症引起患者许多器官对肿瘤的易感性,目前认为慢性炎症与约五分之一的人类肿瘤相关。溃疡性结肠炎是一种主要累及直肠、结肠黏膜的慢性非特异性炎症,以腹痛、腹泻、黏液脓血便、里急后重为主要临床表现,病程迁延不愈,长达十几年甚至几十年。UC的严重后果之一是发生结直肠癌,UC患者发生结直肠癌的风险较一般人群高,病程长、发病年龄小、病变广泛、炎症程度重、伴假炎性息肉的出现、伴原发性硬化性胆管炎、有CRC家族史等更易发生结直肠癌。溃疡性结肠炎相关性结肠癌病理机制与散发性结直肠癌不同,散发性结直肠癌是目前癌变机制研究较为清楚的肿瘤之一,Fearon和Vogelstein提出‘结直肠癌的基因途径”中一系列基因改变导致腺瘤并最终癌变。在这一模式中肿瘤的启动因素是各种基因顺序发生的突变,其中最重要的是APC基因突变导致Wnt信号途径的活化。Wnt途径在结肠炎相关癌变过程中同样起重要作用,但其激活并不是由于APC基因、K-ras基因等突变所致,与散发性结直肠癌癌变之间存在着差异,但具体机制仍未清楚。研究目的：本实验拟通过采用在UC及CRC中发挥重要作用的细胞因子TNF-α及IL-6,作用于正常结肠细胞及结肠癌细胞株,观察其对Wnt信号通路中关键蛋白β-catenin的影响,并探索可能的信号通路,以验证溃疡性结肠炎相关性结肠癌发病的可能机制,即各种炎性因子可能取代散发性结肠癌中的基因改变,导致溃疡性结肠炎癌变的发生和发展。研究方法：选用正常结肠细胞CCD841CoN.结肠癌细胞株HCT116, Western blot检测细胞的β-catenin蛋白表达水平,实时荧光定量PCR检测细胞的β-catenin mRN A表达水平；给予细胞因子IL-6及TNF-a刺激,Western Blot检测β-catenin蛋白表达,实时荧光定量PCR检测β-catenin mRNA表达,免疫共沉淀的方法检测与细胞核内TCF4蛋白结合的β-catenin蛋白量的变化,双荧光素酶报告基因方法检测β-catenin/TCF4复合物对Wnt途径的影响,比色法定量检测细胞GSK3β激酶活性；分别加入MAPK信号通路特异性抑制剂PD98059及PI3K信号通路特异性抑制剂LY294002后观察上述各项实验指标的变化。研究结果：1β-catenin在不同结肠正常细胞及结肠癌细胞细胞株的基础表达水平不同,在蛋白水平DLD-1.HCT116、SW480细胞中β-catenin表达量相对较多,CCC-HIE-2、 Lovo、HT29细胞中β-cate nin表达量相对较少,RKO及CCD841CoN无该蛋白的表达。在mRNA水平,SW480细胞β-cate nin表达量相对较多,HT29细胞β-cate nin表达量相对较少,HCT116、DLD-1、Lovo、RKO及CCC-HIE-2细胞表达量中等；2.IL-6及TNF-α作用于HCT116细胞导致β-cate nin表达升高的最适宜浓度及作用时间分别为,IL-650ng/ml作用于HCT116细胞6h,TNF-α50ng/ml作用于HCT116细胞6h；3.IL-6(50ng/ml,6h)或TNF-α[(50ng/ml,6h)作用于HCT116细胞,均导致β-catenin在蛋白水平及mRNA水平明显升高；4.IL-6(50ng/ml,6h)或TNF-α(50ng/ml,6h)作用于HCT116细胞,升高的β-caten in蛋白进入细胞核,与TCF4结合形成复合物增多,其中TNF-α作用更加明显;5.IL-6(50ng/ml,6h)或TNF-α[(50ng/ml,6h)作用于HCT116细胞,升高的β-catenin/TCF4复合物,能导致Wnt途径上调；6.IL-6(50ng/ml,6h)对HCT116细胞的上述作用可被Pi3K信号通路抑制剂LY294002(30umol/L,1h)阻断,TNF-α[(50ng/ml,6h)对HCT116细胞的上述作用可被Pi3K信号通路抑制剂LY294002(30umol/L,1h)及MAPK信号通路抑制剂PD98059(20umol/L,1h)阻断,其中以LY294002作用为主。7.HCT116细胞分别给予IL-6(50ng/ml,6h)或TNF-α[(50ng/ml,6h)刺激后,GSK3β活性降低,该作用可被LY294002或PD98059部分抑制。研究结论：细胞因子IL-6或TNF-α作用于HCT116细胞,分别通过Pi3K信号通路或Pi3K、MAPK信号通路上调β-cate nin的表达,部分抑制GSK3β活性,导致β-cate nin表达上升,升高的β-cate nin蛋白进入细胞核,与TCF4结合形成转录复合物,上调Wnt途径。本研究表明炎性细胞因子可能通过相关的信号通路作用,激活Wnt途径。该过程与散发性CRC癌变机制不同,为溃疡性结肠炎可能的癌变机制提供了依据。第二部分结直肠息肉危险因素分析研究背景：结直肠癌是人类最常见的恶性肿瘤之一,且具有较高的死亡率,西方国家很早就提出筛查方案并大力推广,结直肠癌的发病率与死亡率呈明显下降趋势。但在我国,随着我国生活水平的提高及生活方式的西化,结直肠癌在我国的发病率呈明显上升趋势。基于“腺瘤-不典型增生-癌”的癌变模式,认为结直肠息肉中的腺瘤是其癌症发生的重要癌前病变。若及时发现并顺利切除,结直肠癌发生率可显著降低。我国尚无结直肠癌及其腺瘤的筛查方案,绝大多数患者并未作结直肠的定期检查,60%的CRC患者在发现时已达到中晚期。因此通过对人群筛查早期发现结直肠息肉尤其是腺瘤,对结直肠癌的预防、治疗及预后等具有重要意义。研究目的：探讨结直肠息肉发病相关的危险因素,为临床开展有针对性的筛查提供依据。研究方法：回顾性病例对照研究,选取在北京协和医院内镜中心行结肠镜检查发现结直肠息肉的病例,以健康体检人群行结肠镜未发现异常的病例为对照,给予问卷调查相关高危因素及分析息肉内镜下表现,采用SAS9.2软件对数据进行统计学分析。研究结果：本研究共纳入结直肠息肉106例,正常对照组383例。单因素分析性别、年龄、癌症家族史、消化道手术史、摄食新鲜水果蔬菜、摄食红肉、摄食腌制食物、吸烟、饮酒等与结直肠息肉发生有关。进一步通过多因素Logistic回归分析年龄(OR=1.343,95%CI：1.063-1.697)、癌症家族史(OR=3.013,95%CI:1.675-5.419)、摄食红肉(OR=1.650,95%CI:1.085-2.509)是发病的独立危险因素。而摄食新鲜水果蔬菜(OR=0.119,95%CI:0.076-0.188)是保护性因素。在息肉患者中,男性息肉瘤性检出率高于女性(P<0.05),随着年龄增大,腺瘤性息肉发生率显著增加(P<0.05)。研究结论：年龄、癌症家族史、红肉摄入比例高是结直肠息肉发生的独立危险因素,摄入新鲜水果蔬菜为保护性因素。老年男性患者息肉瘤性率增加。通过高危因素问卷调查,有助于有针对性的开展结直肠肿瘤筛查。