玉郎伞多糖的提取、分离纯化和结构研究

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玉郎伞(Yulangsan)为豆科蝶形花亚科植物疏叶崖豆(Millettia Pulcha Kurz var. Laxior(Dunn) Z. Wei)的干燥块根,主要分布于华南地区和西南地区,其作为传统的民间用药,常用于消化不良、小儿干瘦、病后虚弱、风湿关节肿痛,也用于外治疗疮肠肿毒,跌打损伤。近几年来,国内部分学者对玉郎伞的活性成分和相关药理、药效及作用机制进行了初步的研究。本文以玉郎伞为原料,对玉郎伞的化学成分进行了研究,主要是对玉郎伞多糖进行了提取、分离及纯化,并对多糖组分的理化性质和结构进行分析。主要研究内容及结果如下:   1.利用GC-MS技术对玉郎伞挥发油的化学组成进行了分析。从玉郎伞挥发油中分离、鉴定出21个化学组分的结构,占挥发油总量的63.08%,其主要成分为倍半萜类、脂肪酸、醛酮类化合物等,其中含量最高的是反式-橙花叔醇,其后依次是棕榈酸和棕榈醛。   2.对玉郎伞多糖的热水浸提工艺进行了研究。考察了热水浸提玉郎伞多糖的方法,优化了提取工艺条件。结果表明,采用传统热水提取,在料液比为1:30,提取温度为80℃,提取时间为4h,玉郎伞多糖提取得率2.76%,粗产品总糖含量为35.60%。   3.采用超滤的方法对玉郎伞多糖溶液进行分离,并通过柱层析法对超滤后的玉郎伞多糖进行纯化。实验选用了截留分子量为50KDa和10KDa的聚醚砜膜进行超滤,得到三种不同分子量的多糖样品:YLS1,YLS2和YLS3,总糖含量分别为29.40%,36.72%和41.93%。经DEAE-52离子交换柱层析和Sepharose CL-6B柱层析分离纯化所得的多糖样品,含量均达到93.63%以上。   4.对玉郎伞多糖样品YLS1-1-2、YLS2-1-2和YLS3-1-2进行了理化性质研究。采用Shodex Sugar KS-801和Shodex Sugar KS-805串联柱进行分子量测定,结果表明:YLS1-1-2、YLS2-1-2和YLS3-1-2洗脱曲线呈狭窄对称峰,分子量分别为5.2446×104g·moL-1、3.2242×104g·moL-1和0.9612×104g·moL-1。多糖样品的单糖组成分析表明,样品YLS1-1-2和YLS3-1-2均含葡萄糖组分,YLS2-1-2含有三种单糖组分,分别是葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖。   5.核磁共振波谱分析表明:YLS1-1-2和YLS3-1-2多糖样品中葡萄糖残基均以1→4糖苷键连接,重复结构是→4)-α-D-Glc-(1→4)-α-D-Glc-(1→;YLS2-1-2多糖样品中的葡萄糖残基以1→4糖苷键连接,半乳糖残基以1→2糖苷键连接,阿拉伯糖残基以1→4糖苷键连接,基本骨架是由3个→4)-α-D-Glc-(1→、2个→2)-α-D-Gal-(1→和1个→4)-α-D-Ara-(1→连接的重复单元结构。
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