鸡志贺菌病例于2004年由许兰菊、王川庆等人首次报道，志贺菌感染雏鸡主要表现为脓血痢，能够引起雏鸡死亡。研究显示志贺菌具有人禽互传的可能。O-抗原作为细菌的主要表面抗原，在细菌进化成病原菌的过程中起重要作用，又由于O-抗原具有丰富的多样性导致其O-抗原基因簇的保守性很低，因此在DNA水平上研究分子进化关系，尤其在大肠杆菌和志贺菌遗传进化关系方面，O-抗原基因簇成为最好的研究材料。本研究对鸡鲍氏志贺菌O-抗原基因簇进行破译，旨在从DNA水平上对鸡源志贺菌的起源和进化地位进行分析。获得提纯O-抗原多糖的方法及初步研究其毒性作用，旨在为从细菌内毒素方面研究鸡鲍氏志贺菌的致病作用奠定基础。具体研究如下：测定鸡源鲍氏志贺菌O-抗原基因簇序列，进行遗传进化分析，并对其基因功能预测。采用长程PCR方法扩增O-抗原基因簇，设计6对相互嵌合引物，克隆测序，拼接后获得全基因序列，用生物信息学方法完成基因注释并预测其功能，对galF和gnd基因进行遗传演化分析。结果显示鸡源鲍氏志贺菌O-抗原基因簇序列全长为12742bp，其与人源鲍氏3型志贺菌和大肠杆菌O167的同源性最高，其核苷酸同源性分别为99.9%和99.8%；氨基酸同源性分别为99.9%和99.5%。共发现9个基因：吡喃型UDP-半乳糖变位酶基因（glf，1089bp）、O-抗原转运酶基因（wzx，1266bp）、O-抗原聚合酶基因（wzy，1251bp）和糖基转移酶基因（orf3，1203bp；orf4，855bp；orf5，969bp；orf7，1092bp；orf8，639bp；orf9，633bp）。研究表明人源鲍氏3型志贺菌可能由大肠杆菌O167进化而来，而鸡源鲍氏志贺菌可能来源于人源鲍氏3型志贺菌。为获得高纯度的鸡鲍氏3型志贺菌脂多糖（LPS）及其亚单位O抗原多糖（O-PS)，采用改良热酚水法提取鸡源志贺菌的LPS，并联合使用葡聚糖凝胶层析得到高纯度的LPS；采用酸水解法联合葡聚糖凝胶层析获得高纯度的O-PS。PAGE银染结果显示LPS呈现不均一的梯形带，对提取物进行蛋白质和核酸含量测定显示所提纯LPS和O-PS纯度高，LPS蛋白含量仅为1.83%，O-PS蛋白含量仅为0.28%。本试验结果表明提取的LPS和O-PS可进行特异性研究及制备有效的候选疫苗。为研究鸡源鲍氏志贺菌脂多糖（LPS）亚单位O-抗原多糖（O-PS）的特异性致病作用。采用改良热酚水法并联合葡聚糖凝胶层析得到高纯度的LPS；采用酸水解法联合葡聚糖凝胶层析获得高纯度的O-PS，对其进行体内外试验，观察其毒性作用并与LPS作对比。结果显示0.25~250μg/mL范围内的O-PS处理的Hela细胞组与对照组相比均有显著差异（P<0.01），表明鸡源鲍氏志贺菌O-PS对Hela细胞的增殖具有损伤作用，可引起Hela细胞病变，而LPS不能引起细胞病变；O-PS体内兔回肠襻试验中仅引起肠粘膜轻微出血；而LPS能引起回肠壁充血、水肿及化脓，对肠粘膜造成严重损伤。本研究表明鸡源鲍氏志贺菌LPS的亚单位O-PS具有细胞毒性作用，但其毒性表现不同于完整的LPS。