1979年,Senger首先报道了恶性转化的上皮细胞可分泌一种磷酸蛋白,即骨桥蛋白(OSteopontin,OPN)。OPN是富含天冬氨酸和唾液酸残基的可分泌糖蛋白,包含有多种功能域。通过与整合素和CD44受体的结合,OPN可介导细胞与基质的相互作用及细胞内信号转导。近年来,越来越多的证据显示,OPN在许多肿瘤细胞中表达上调,并与肿瘤血管生成、侵袭转移、抑制凋亡等方面关系密切。然而,OPN在胃癌中的作用及调节机制目前尚不完全清楚。 本研究检测了OPN在胃癌组织中的表达,分析了OPN表达与胃癌分期等临床资料的相关性,初步探讨了OPN、COX-2、VEGF、MVD在胃癌中的相互关系,并以体外建系的胃癌细胞为模型,采用siRNA等手段调控OPN的表达,研究OPN在胃癌中的调节机制及其对胃癌恶性生物学行为和血管生成的作用,为进一步阐明胃癌发生发展规律奠定理论基础。 【目的】(1) 分析OPN在胃癌组织和胃癌细胞系中的表达及意义;(2)研究OPN表达在胃癌中的调控机制;(3)探讨OPN对胃癌细胞恶性生物学行为和血管生成的作用。 【方法】(1) 采用免疫组织化学方法检测OPN在胃癌组织中的表达,分析OPN与胃癌临床资料、COX-2、VEGF、MVD的相互关系;(2)采用RT-PCR和Western blotting方法检测OPN在胃癌细胞系中的表达;(3)构建OPN siRNA载体,为OPN体外功能研究提供工具;将构建的载体转