虫草肾茶胶囊对高糖培养下人肾小球系膜细胞影响的实验研究

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:yl9
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目的:观察虫草肾茶胶囊对高糖培养条件下人肾小球系膜细胞(HMC)的影响,并探讨虫草肾茶胶囊对糖尿病肾病(DN)肾脏保护作用的机制。方法:首先采用血清药理学的方法制备虫草肾茶胶囊及福辛普利药物血清,再进行药物血清干预HMC的研究。将常规培养的HMC分为正常对照组、高糖组、虫草肾茶高、中、低剂量组、福辛普利组,采用高糖模型(即高糖刺激体外培养的系膜细胞)进行研究。正常对照组予10%正常大鼠FCS改良型RPMI-1640培养液培养干预,高糖组予10%正常大鼠FCS改良型RPMI-1640高糖培养液培养干预,虫草肾茶高、中、低剂量组分别予10%虫草肾茶胶囊高、中、低剂量含药血清改良型RPMI-1640高糖培养液培养干预,福辛普利组予10%福辛普利含药血清改良型RPMI-1640高糖培养液培养干预。分别在相应干预因素处理后,于培养的24h、48h及72h用MTT法检测各组细胞增殖的情况;于相应干预因素作用48h及72h后,用ELISA法检测细胞培养液上清中转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、层粘连蛋白(LN)的含量;用实时定量PCR方法检测人肾小球系膜细胞转化生长因子-β1mRNA(TGF-β1mRNA)、纤维蛋白溶解酶原激活物抑制剂-1mRNA(PAI-1mRNA)的表达。结果:(1)虫草肾茶胶囊高剂量药物血清对高糖(30mmol/L)刺激下24h、48h和72h的HMC的增殖均有抑制作用(p<0.05,p<0.01),其作用优于福辛普利药物血清。虫草肾茶胶囊中、低剂量药物血清对高糖刺激下48h和72h的HMC的增殖有抑制作用(p<0.05)。(2)在48h和72h时段,虫草肾茶胶囊高、中剂量组TGF-β1的分泌明显低于高糖组(p<0.05,p<0.01),而虫草肾茶胶囊低剂量药物血清及福辛普利药物血清对72h时段TGF-β1的分泌有抑制作用(p<0.05)。在抑制TGF-β1的分泌方面,虫草肾茶胶囊优于福辛普利。(3)虫草肾茶胶囊高、中、低剂量组及福辛普利组48h及72h HMCⅣ型胶原的合成均低于高糖组(p<0.05,p<0.01)。(4)虫草肾茶胶囊高剂量组细胞培养上清中FN、LN在48h时段和72h时段的分泌均低于高糖组(p<0.05,p<0.01),而虫草肾茶胶囊中、低剂量药物血清及福辛普利药物血清在72h时段可减少细胞培养上清中FN、LN的分泌(p<0.05,p<0.01)。(5)虫草肾茶胶囊高、中剂量组及福辛普利组TGF-β1mRNA和PAI-1mRNA表达均低于高糖组,且以虫草肾茶胶囊高剂量组表达最低(p<0.05)。结论:虫草肾茶胶囊可以抑制高糖刺激下HMC的增殖,降低高糖刺激下TGF-β1及细胞外基质(ECM)主要成分FN、LN、Col-Ⅳ的合成和分泌,下调高糖刺激下HMC TGF-β1mRNA及PAI-1mRNA的表达,起到延缓DN进展的作用。
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