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第一部分经十二指肠持续输注利拉鲁肽通过激活GLP-1受体降低肝糖生成目的：探讨十二指肠持续输注利拉鲁肽对普食喂养大鼠肝脏葡萄糖生成的影响。方法：300-350g雄性SD大鼠普食喂养,构建大鼠十二指肠灌注系统,根据输注液不同将大鼠分为生理盐水组(saline组),利拉鲁肽组(GLP-1组),GLP-1受体拮抗剂-—Exendin Fragment 9-39组(Ex-9组),利拉鲁肽+Exendin Fragment 9-39组(GLP-1+Ex-9)组,利用3-3H葡萄糖为示踪剂的胰腺(基础胰岛素)钳夹技术评价各组大鼠糖代谢的变化。结果：基础胰岛素钳夹稳态,GLP-1组葡萄糖输注率(GIR)明显高于saline组(7.4±0.3 mg·kg-1·min-1 vs 2.2±0.3 mg·kg-1·min-1,P<0.01)：GLP-1组肝糖输出率(HGP)明显低于saline组(10.2±0.5 mg·kg-1·nin-1 vs 17.2±1.1 mg·kg-1·min-1,P<0.01)；GLP-1和saline组肝糖输出抑制率分别为48.7%和18.8%,具有统计学差异(P<0.01)；共灌注GLP-1及Ex-9,十二指肠输注GLP-1增加GIR,减少HGP的效应减弱。各组间葡萄糖摄取率(GU)无统计学差异(P>0.05)。结论：经十二指肠输注利拉鲁肽通过激活肠GLP-1受体增加胰岛素敏感性,减少肝糖输出。第二部分十二指肠持续输注利拉鲁肽通过“肠-脑一肝轴”调节糖代谢目的：探讨十二指肠利拉鲁肽调节糖代谢的神经通路机制。方法：300-350g雄性SD大鼠普食喂养,构建大鼠十二指肠灌注系统、第四脑室孤束核微量灌注系统、肝迷走神经离断等动物模型。实验分为十二指肠输注生理盐水组(saline组),十二指肠输注利拉鲁肽组(GLP-1组),十二指肠输注丁卡因组(tetracaine组),十二指肠输注利拉鲁肽+丁卡因(GLP-1+tetracaine组),十二指肠输注生理盐水+第四脑室孤束核输注MK-801组(NTS MK-801组),十二指肠输注利拉鲁肽+第四脑室孤束核输注MK-801组(GLP-1+NTS MK-801组),十二指肠输注生理盐水+肝迷走神经离断组(HVAG组),十二指肠输注利拉鲁肽+肝迷走神经离断组(GLP-1+HVAG组)。利用3-3H葡萄糖为示踪剂的基础胰岛素钳夹技术评价各组大鼠糖代谢的变化。Western blot法检测各组大鼠肝脏PEPCK, G6Pase, IR/P-IR、IRS/P-IRS、 AKT/P-AKT等蛋白表达。结果：十二指肠单独给予丁卡因对机体糖动力学无影响,联合输注丁卡因及利拉鲁肽可阻断十二指肠利拉鲁肽增加葡萄糖输注率及减低肝糖生成率的效应,且该作用不依赖于血浆葡萄糖和胰岛素的改变。同样,钳夹稳态期间,单独NTS输注MK-801对机体糖动力学无影响,但其可阻断十二指肠利拉鲁肽增加葡萄糖输注率及减低肝糖生成率的效应,该作用不依赖于血浆葡萄糖和胰岛素的改变。再者,接受肝脏迷走神经离断术后的大鼠,十二指肠输注利拉鲁肽不能使葡萄糖输注率增加,肝糖生成率降低,该作用不依赖于血浆葡萄糖和胰岛素的改变。单独肝脏迷走神经离断对糖代谢无影响。GLP-1组肝脏PEPCK和G6Pase蛋白水平明显低于其他各组(均P<0.05),而P-IR、P-IRS-1及P-AKT水平则明显高于其他各组(均P<0.05)。结论：十二指肠输注利拉鲁肽通过“肠-脑-肝轴”调节肝脏葡萄糖输出。第三部分GLP-1受体参与十二指肠输注脂质影响糖代谢的过程目的：探讨十二指肠输注脂质影响糖代谢是否需要激活GLP-1受体。方法：300-350g雄性SD大鼠普食喂养,构建大鼠十二指肠灌注系统,根据输注液不同实验分为：十二指肠输注Ex-9组,十二指肠输注脂质(lipid组),十二指肠输注脂质+Ex-9组(lipid+Ex-9)组。利用3-3H葡萄糖为示踪剂的基础胰岛素钳夹技术评价各组大鼠胰岛素敏感性和糖代谢的变化。结果：基础胰岛素钳夹稳态,lipid组GIR明显高于Ex-9组(6.1±0.3 mg·kg-1·min-1 vs 2.8±0.3 mg·kg-1·min-1,P<0.001),lipid组HGP明显低于Ex-9组(11.2±0.9 mg·kg-1 min-1 vs 15.9±0.6 mg·kg-1·min-1,P<0.01)；lipid和saline组肝糖输出抑制率分别为43.5%和26.4%,具有明显差异(P<0.05)；共灌注lipid及Ex-9,十二指肠输注lipid增加GIR,减少HGP的效应减弱。各组GU无明显差异(P>0.05)。结论：十二指肠输注lipid增加胰岛素敏感性,降低肝脏葡萄糖输出的效应需要激活肠GLP-1受体。第四部分 十二指肠持续输注利拉鲁肽激活肠粘膜PKC-δ分子调节肝脏葡萄糖输出目的：探讨十二指肠输注利拉鲁肽影响糖代谢的肠内分子机制。方法：300-350g雄性SD大鼠普食喂养,构建大鼠十二指肠灌注系统,根据输注液不同实验分为：十二指肠输注saline组,十二指肠输注GLP-1组,十二指肠输注saline+PKC-δ特异性抑制剂Rottlerin(ROT)组,十二指肠输注利拉鲁肽+Rottlerin (GLP-1+ROT)组。利用3-3H葡萄糖为示踪剂的基础胰岛素钳夹技术评价各组大鼠糖代谢的变化。结果：基础胰岛素钳夹稳态,GLP-1+ROT组GIR明显低于GLP-1组(3.2±0.5 mg·kg-1·min-1 vs 7.4±0.3 mg·kg-1·min-1,P<0.001),而HGP则明显高于saline组(16.8±1.0 mg·kg-1 min-1 vs 10.2±0.5 mg·kg-1·min-1,P<0.01)；GLP-1+ROT和GLP-1组肝糖输出抑制率分别为22.9%和48.7%,具有明显差异(P<0.01)。各组GU无明显差异(P>0.05)。共灌注利拉鲁肽及Rottlerin,十二指肠输注GLP-1增加GIR,减少HGP的效应消失。结论：十二指肠输注利拉鲁肽降低肝脏葡萄糖输出需要激活肠粘膜PKC-δ分子