小口径血管一般是指直径小于6mm的血管,人工血管移植物已经被大量地应用于临床实践中,目前临床上常用的主要有自体血管移植物、异体血管移植物和人工合成的高分子材料血管移植物等3大类血管移植物。其中前两类由于来源有限与异体排斥反应局限了其临床应用,而高分子合成材料制成的人工血管已在大口径血管移植方面取得了比较大的进展,但在小口径血管移植方面一直没有取得突破性进展,究其原因主要还是由于血管材料的内皮化功能欠缺,机械性能不如天然血管等,故本文采取将细胞种植于人工材料表面的方法,制备人源性细胞外基质-高分子材料复合的生物血管,以弥补人工血管的缺陷。细胞外基质以及细胞外基质蛋白是作为所有细胞生长的基础环境和结构物质存在的,对于干细胞、癌细胞、遗传性疾病等都起着非常重要的作用。细胞外基质最主要的功能是细胞生活的结构支撑,除此之外,细胞外基质中还包含着多种功能多样的细胞外基质蛋白,这些蛋白各自独立,有着自己独立的功能和职责,但又相互作用,共同服务于细胞和组织,使细胞更好地生长繁殖。其中一些粘附整合蛋白,调解细胞间的粘附和转导。ECM蛋白质也可以结合可溶性生长因子,影响细胞的分布、激活和表型。ECM的蛋白质组成是个非常复杂的混合体系,有胶原蛋白、黏连蛋白、糖蛋白等,各自发挥着不同的作用,共同服务于细胞,促进细胞的增殖、分化等生长过程。肝纤维化现象出现在大部分的慢性肝脏疾病中,主要表现为以胶原蛋白为主的细胞外基质蛋白的过度异常累计。快速的肝纤维化会导致肝硬化、肝脏衰竭等疾病,随着我们对于肝纤维化的细胞分子机制的认识和了解,发现活化的肝星状细胞、成纤维细胞、骨骼来源的肌成纤维细胞作为机体主要的生产胶原的细胞,在受损的肝脏中发挥着重要的作用。使得这些细胞活化的纤维化因子主要有TGF-β1,血管紧张素-Ⅱ等。本文正是利用这一原理刺激人的肝星状细胞产生大量的胶原蛋白。血液透析人工血管动静脉内瘘应用广泛,但其弹性和顺应性与人体动脉差异很大,不耐受反复穿刺,与吻合血管不匹配,常发生血管狭窄,造成血栓。动脉血管中,细胞外基质(ECM)中的胶原蛋白是维持血管结构和力学性能的主要因素,理想的透析用人工血管应仿生动脉成分和结构。异种ECM来源丰富,但其有潜在的抗原性,面临床上很难获得人源性ECM。人受损肝脏中,肝星状细胞被外界持续激活,过量分泌胶原等ECM而发生肝硬化,本项目拟利用此特性制备具有人ECM成分的透析用生物血管,我们采用静电纺丝技术制备PCL-Gelation-PEG20000纳米纤维支架,再种植激活的肝星状细胞,静态培养下肝星状细胞分泌胶原与PCL纳米纤维交联,比较血管各种性能以获得培养参数,脱细胞后用肝素-壳聚糖水凝胶修饰使血管有抗凝性。