β-catenin和MMP-3在膝骨关节炎滑膜中的表达及意义

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目的:检测不同病变程度骨性关节炎(osteoarthritis,OA)患者膝关节滑膜组织中β连环蛋白(β-catenin)和基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinases-3,MMP-3)的表达差异及两者间的相互关系,初步探讨滑膜组织中 Wnt/β-catenin信号通路与关节软骨退变的关系。  方法:临床上通过收集三峡大学人民医院骨科2014年12月至2015年10月OA患者的膝关节滑膜组织52例,根据关节镜下软骨outerbridge分级标准进行分组:第Ⅰ、Ⅱ级为轻度OA组,共27例;第Ⅲ、Ⅳ级为重度OA组,共25例。单纯膝关节交叉韧带损伤、半月板损伤的非OA患者为实验对照组,共17例。应用Western blot和实时荧光定量PCR法检测β-catenin、MMP-3蛋白和基因在骨性关节炎和非OA患者滑膜组织中的表达情况。免疫组织化学染色法检测β-catenin蛋白在各组滑膜组织中的原位表达情况。所得的实验数据运用SPSS22.0软件进行统计学分析,以α=0.05为检验水准,P<0.05为差异有统计学意义。  结果:(1)关节镜下肉眼观察OA患者滑膜组织有着不同程度的增生充血、纤维化,并有绒毛结节形成。HE染色显示OA患者滑膜组织有着不同程度的炎性改变,大量的炎性细胞浸润,血管增生并扩张。(2)Western blotting结果显示β-catenin和MMP-3蛋白在OA患者滑膜组织中的表达量明显高于对照组,随着关节软骨的损伤程度的加重有着递增的趋势,且OA组中两者在蛋白水平上呈正相关(P<0.01)。(3)实时荧光定量PCR结果显示β-catenin和MMP-3基因在OA患者滑膜组织中的表达量明显高于对照组,Pearson积矩相关系数分析显示两者在基因水平上无明显相关(P>0.05)。(4)免疫组织染色结果显示对照组滑膜组织中β-catenin蛋白的表达仅有2例呈阳性,其阳性率为33.33%;轻度OA组11例呈阳性,其阳性率为78.57%;重度OA组14例呈阳性,其阳性率为93.33%。  结论:(1)OA患者病程越长、关节软骨损伤越重,滑膜的无菌性炎症及临床症状越重。β-catenin、MMP-3基因和蛋白在OA滑膜中的表达量明显高于非OA组,随着关节软骨的损伤程度的加重有着递增的趋势,两者间在蛋白水平上呈正相关。(2)OA患者滑膜组织中Wnt/β-catenin信号通路处于激活状态,可能上调了MMP-3蛋白的表达,与关节软骨的退变有着密切的关系。
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