HIV在1983年被确定为人类免疫缺陷疾病的病原体,从非洲发现第一例感染者30多年间已传播到世界各地造成大流行,对世界经济、卫生和社会稳定造成了巨大影响,引起了世界卫生组织及各国政府的高度重视。由于HIV-1的高突变性和高重组性,产生了不同的流行毒株并逐渐形成了地域差异,由A亚型衍生出的CRF01AE重组型成为了我国最主要的流行亚型（37.6%）。HIV-1无自然清除感染的病例,与HIV-1保护相关的免疫学指标也不是很清楚,使得HIV-1疫苗研发之路困难重重,目前还没有可以引起足够保护效力的预防性HIV-1疫苗。HIV-1膜蛋白（Envelope,Env）在感染中发挥着与细胞受体结合的作用,也含有中和抗体识别的表位,是中和抗体发挥作用的主要靶标,中和抗体与Env的结合对预防HIV-1感染十分重要。假病毒可以替代活毒在BSL-2级实验室进行研究实验,现已广泛应用于病毒研究中。将Env蛋白嵌合在病毒骨架上即可形成单轮感染的功能性假病毒,现已广泛应用于疫苗、抗体及药物的评价。本实验室前期已从感染者血浆中分离构建了涵盖我国主要流行株的B/B’亚型、CRF07/08BC亚型和一些CRF01AE亚型的假病毒。CRF01AE流行趋势日益严重,也出现越来越多的突变株。为了进一步更新丰富CRF01AE亚型假病毒库,并利于相关抗体治疗和疫苗评价等,本论文通过100份感染者血浆,成功构建了36株CRF01AE亚型假病毒以及10株其他小流行亚型假病毒库。对新发CRF01AE亚型毒株序列进行分析发现与库中现有序列差异较大,可以实现对病毒库的扩充。为了进一步分析病毒对广谱单抗（broadly neutralizing monoclonal antibodies,bnmAbs）的反应特性,本实验开展了46株假病毒对11株广谱单抗的中和特性研究,同时,也对单抗识别的表位进行了分析。结果发现,识别CD4结合位点（CD4bs）的广谱单抗对假病毒的中和能力最强,VRC01可以中和100%（46/46）的假病毒,80.4%（37/46）的假病毒能被3BNC117中和;识别近膜胞外区（MPER）的单抗对假病毒的中和效果也较好,4E10能中和67.4%（31/46）的假病毒,10E8能中和76%（35/46）的假病毒;识别V3环区域的广谱单抗对新发CRF01AE亚型假病毒的中和敏感性最差,PGT135甚至不能中和一株假病毒,中和为0%（0/46）,10-1074也只能中和17.3%（8/46）的假病毒。与前期构建的B/B’亚型假病毒的中和特征进行比较,重合使用的8株广谱单抗有7株（VRC01、VRC03、Ig G1b12、2G12、2F5、4E10和10E8）对CRF01AE亚型假病毒更难中和,PG9除外,新筛单抗（如VRC01、10E8）对假病毒的中和效果也要普遍强于前期筛出的单抗（2F5、Ig G1b12）。为了完善国内疫苗中和抗体检测水平,本实验也按照前期方法将假病毒对血浆盘的中和敏感性分成高、中、低三类,并用来评价疫苗引起的体液免疫反应水平。本论文通过分析CRF01AE亚型假病毒对bnmAbs的中和敏感性分析,可为感染者提示一些有效的治疗方案,通过对bnmAbs识别表位的分析也可以为基于CRF01AE亚型的免疫原的设计、疫苗评价等提供信息。另外,新构建入库的假病毒已被用于某些HIV-1预防性疫苗的效力评价当中。综上,本论文关于假病毒库的补充及新构建假病毒的标定也为后期疫苗、治疗性单抗及药物评价提供了较为完善的平台,为我国疫苗的开发及评价提供支持。