中性粒细胞胞外诱捕网在创伤性脑损伤后继发性肺损伤中的作用探究

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目的和意义:创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)作为全球范围内严重的公共卫生问题之一,每年都会导致大量的人员死亡或残疾,造成巨大的社会及个人经济负担。急性肺损伤(acute lung injury,ALI)作为创伤性脑损伤常见的并发症之一,有着高发病率和高死亡率。在创伤性脑损伤引起的急性肺损伤的发病机制中,包括细胞因子的释放、HMGB1的产生和类淋巴系统等等,炎症反应也是参与急性肺损伤的发病机制之一,中性粒细胞作为机体免疫的第一道防线,在炎症反应中起着重要的作用。中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)是中性粒细胞的杀菌方式之一,它主要由DNA、中性粒细胞弹性蛋白酶、髓过氧化物酶和组蛋白等成分组成,是一种网状结构复合物,可以捕捉并消灭病原微生物。然而,中性粒细胞胞外诱捕网是一把“双刃剑”,过多的中性粒细胞胞外诱捕网反而对机体造成伤害。我们探讨创伤性脑损伤后继发的急性肺损伤的发病过程中是否有中性粒细胞胞外诱捕网的参与,为脑损伤后继发急性肺损伤的预防和治疗寻找新的靶点。研究方法:将雄性Sprague-Dawley大鼠(体重250-300克)用7%水合氯醛(0.5ml/100g体重)进行腹腔注射麻醉,采用液压冲击脑损伤仪制作大鼠的重型脑损伤模型。分组:实验组以颅脑打击后的时间点作为分组依据,分为5min、30min、1h、6h、12h五组。以假手术组作为对照,假手术组经过同样的处理,包括开颅去骨瓣手术,但不进行脑损伤打击。取各组大鼠的血液及肺组织标本进行肺损伤和中性粒细胞胞外诱捕网相关指标的检测,包括肺组织的湿/干重比、组织切片形态学检查、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)含量、中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)含量、组蛋白H3(histone H3)含量及冰冻切片免疫荧光检查,以及血清的髓过氧化物酶含量、中性粒细胞弹性蛋白酶含量和组蛋白H3含量的检测。结果:创伤性脑损伤组的大鼠出现明显的肺水肿、肺泡结构破坏以及中性粒细胞、红细胞浸润表现。创伤性脑损伤组大鼠的血清及肺组织中髓过氧化物酶、中性粒细胞弹性蛋白酶、组蛋白H3的含量升高。创伤性脑损伤组大鼠的肺组织冰冻切片的免疫荧光提示存在中性粒细胞胞外诱捕网的标志物。结论:中性粒细胞胞外诱捕网参与了创伤性脑损伤后继发急性肺损伤的发病机制当中,这可能为预防和治疗创伤性脑损伤后继发急性肺损伤提供新的靶点。
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