磁场对固定化酶的活性及稳定性的影响

来源 :天津大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:atianjun
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为了探究磁场对固定化酶的影响,本文选取固定化α-淀粉酶和固定化过氧化氢酶为研究对象,首先对这两种酶进行了固定化,得出了它们的最佳固定化条件:对α-淀粉酶固定化后发现,最佳加酶量为每15mL壳聚糖溶液中加入3mL酶液(1mg/mL),交联剂用量为100mL,交联时间0.5小时;对过氧化氢酶固定化后发现,最佳加酶量为每15mL壳聚糖溶液中加入2mL酶液(0.4mg/mL),交联剂用量和交联时间与α-淀粉酶相同。然后在不同磁场强度的永磁场中,进行一定时间的磁化处理,从固定化酶的活性、酶促反应动力学和操作稳定性等几方面进行考察。研究结果表明,外加磁场对不同的固定化酶会产生不同的影响:对于固定化α-淀粉酶,磁化后酶的活性明显增加,且随磁场强度增大活性增加逐渐减小,同时,固定化α-淀粉酶的Km变小,pH稳定性增强,保存时间延长;而对于固定化过氧化氢酶,磁化后酶的活性也增大,但是和固定化α-淀粉酶不同的是,磁场强度越大,活性增加越明显。同样,固定化过氧化氢酶的Km减小,pH稳定性增强,保存时间延长。此外,磁场对某个固定化酶的影响并不是呈简单的线性关系。 本文分别对不同磁场强度下酶促反应动力学的实验数据进行了拟合,得到了两种固定化酶的米氏常数Km,并对拟合结果进行了检验。 本文针对所研究的物系,从磁学基本理论及磁化机理分析入手,讨论了磁场对固定化酶的结构的影响,并对磁场影响固定化酶的机理进行了探讨。认为磁场主要是通过影响酶和载体的结构,从而影响固定化酶酶促反应,并以此为依据,对实验现象进行了解释。
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