脑红蛋白在沙鼠低氧预处理后脑缺血中的表达变化及其对Na<'+>,K<'+>-ATP酶活性的影响

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研究目的与背景:脑卒中的发病率和死亡率一直呈上升趋势,目前的治疗方法效果都不十分理想,因此寻找一种有效而可行的脑保护途径十分有必要。本研究从低氧预处理入手,探讨了具有神经保护作用的物质——脑红蛋白(Neuroglobin,Ngb)在经低氧预适应处理后的表达变化,并且观察了与Ngb具有密切关系的Na+,K+-ATP酶活性的变化,探讨了Ngb脑保护作用可能的机制。 方法: 1.低氧预处理模型的建立:将沙鼠置于室温常压含8%O2和92%N2混和气体环境中持续2小时,使沙鼠形成对低氧的预适应。 2.沙鼠脑缺血模型的建立:由于沙鼠独特的脑血管结构,其前后循环保持相对独立,故结扎颈总动脉时后循环的血液不能经侧支循环到达前脑,可以造成完全性前脑缺血。 3.观察指标:从NgbmRNA和Ngb阳性细胞两个指标入手,观察Ngb在转录和翻译两个水平上的变化规律,并测定Na+,K+-ATP酶活性变化的规律。 4.结果分析方法:NgbmRNA经逆转录聚合酶链反应产物经琼脂糖凝胶电泳所得图像,采用Alphalmager 2200紫外凝胶分析仪观察分析,以ID Image Analysis Software进行表达强度测定。通过BI 2000图象分析系统计数Ngb阳性细胞数量分析Ngb免疫组化结果。使用SPSS10.0软件进行数据的统计处理。 结果:在脑缺血时,低氧预处理组沙鼠较非低氧预处理组NgbmRNA和Ngb都明显增多,且Na+,K+-ATP酶活性与Ngb表达量在一定范围内有量效关系但非直线关系。 结论:低氧预处理可以使沙鼠脑缺血时Ngb表达较非低氧预处理增加,Ngb增多时Na+,K+-ATP酶活性有所降低。故Ngb的脑保护作用可能与Na+,K+-ATP酶有关。
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