葛氏鲈塘鳢多糖的提取纯化和结构表征及生物活性研究

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本文以葛氏鲈塘鳢(Perccottus glenii)鱼头为原料,利用现代分离纯化技术,对葛氏鲈塘鳢多糖的提取、分离纯化、结构以及生物活性进行了系统的研究。主要研究内容如下:1.葛氏鲈塘鳢鱼头粗多糖(PGP)提取和生物活性研究。采用碱提醇沉法提取PGP,得率为8.2%;PGP中总糖、蛋白和脂肪含量分别为11.5%、69.9%和0.1%;PGP具有体外羟自由基清除能力、总还原能力、α-葡萄糖苷酶和血管紧张素I转换酶(ACE)抑制能力;PGP可提高小鼠肝组织和血清中总超氧化物歧化酶活力、还原型谷胱甘肽活力和总抗氧化能力,抑制羟自由基产生,降低丙二醛含量。说明PGP具有一定的体外生物活性和较好的体内抗氧化活性。2.脱蛋白多糖(PGP-D)结构和生物活性研究。采用Seavg试剂、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和酶-Seavg联用脱除PGP中蛋白,得到PGP-D,其中胃蛋白酶效果最佳,蛋白脱除率为86.0%,多糖损失率为3.7%,羟自由基半清除率为47.6%;PGP-D主要由阿拉伯糖、鼠李糖、甘露糖、半乳糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸组成,相对含量依次为8.0%、3.3%、7.3%、3.6%、4.5%和45.6%,是一种含有β-糖苷键的酸性杂多糖。体外生物活性研究表明:PGP-D具有羟自由基清除能力、总还原能力以及ACE抑制能力,且均优于PGP,但对α-葡萄糖苷酶活力具有一定促进能力。3.纯化多糖结构和生物活性研究。PGP-D经DEAE-52纤维素和Sephadex G-100凝胶柱层析后得到三种均一组分多糖(PGP-0、PGP-1和PGP-2),分子量分别为2.9k D、2.3k D、3.2k D,均由阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸组成,但相对含量差异较大;扫描电镜图片表明各组分多糖的表面形貌虽然不同,但光滑细腻,推测该多糖分子间相互作用力较强;紫外光谱和红外光谱表明各组分多糖均显示了典型的糖类吸收峰,是一种以β-糖苷键连接的吡喃杂多糖;核磁共振分析表明各组分多糖含有糖醛酸,其异头构型均为β-型异头碳,为吡喃糖。体外生物活性研究表明PGP-0、PGP-1和PGP-2均具有羟自由基清除能力、总还原能力以及ACE抑制能力,其中PGP-1的效果最佳。
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